瘦素對(duì)小鼠心肌缺血再灌注損傷的作用研究.pdf

1、目的:監(jiān)測小鼠心肌缺血再灌注損傷(MIRI)過程中,血清炎性細(xì)胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α、小鼠血清心肌肌鈣蛋白I、心肌MPO活性水平變化和心肌冷/熱缺血再灌注損傷的差異性,研究瘦素和茶多酚預(yù)處理對(duì)其的影響。
　　方法:1.將40只雄性C57BL/6小鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、MIRI模型對(duì)照組、MIRI瘦素預(yù)處理組(小鼠在MIRI手術(shù)前30min給予腹腔注射重組瘦素(recombinant mouse leptin))和MI

2、RI術(shù)后瘦素處理組(小鼠于MIRI手術(shù)后30min給予腹腔注射重組瘦素)。在MIRI手術(shù)后3h和6h分別取小鼠血清及心肌組織,測定小鼠血清炎性細(xì)胞因子IL-6、TNF-α水平和心肌、血清瘦素水平。
　　2.將30只雄性C57BL/6小鼠被隨機(jī)分為3組:(1)心肌冷缺血再灌注損傷組(Cardiac transplant組):瘦素預(yù)處理(術(shù)前30分鐘予腹腔注射重組瘦素(recombinant mouse leptin,美國R&DSys

3、tems公司),劑量為50μg/kg。)后行同種間小鼠腹部心臟移植,供體置于4℃UW液中保存6小時(shí);(2)心肌熱缺血再灌注損傷組(Leptin+MIRI組);(3)心肌缺血再灌注模型對(duì)照組(MIRI組)。分別于術(shù)后6小時(shí)收獲移植心臟與血清標(biāo)本,觀察組織形態(tài)學(xué)變化,檢測小鼠移植心臟及血清中性粒細(xì)胞活性,炎性細(xì)胞因子水平等。
　　3.將40只雄性C57BL/6小鼠被隨機(jī)分為4組:(1)對(duì)照組。(2)心肌缺血/再灌注模型組(MIRI組)

4、。(3)茶多酚組。(4)瘦素處理組。以上四組小鼠分別于MIRI手術(shù)后6小時(shí)收獲標(biāo)本,分別測定小鼠心肌組織瘦素水平、NOX-4mRNA表達(dá)、髓過氧化物酶活性(MPO)、過氧化氫(H2O2)含量、血清丙二醛(MDA)活性以及超氧化物岐化酶(SOD)含量。
　　結(jié)果:1.與假手術(shù)組[(12.3±5.8)pg/ml,(13.1±5.9)pg/ml;(6.2±1.9)pg/ml,(7.0±2.0)pg/ml,P<0.01]相對(duì)照,MIRI瘦

5、素預(yù)處理組[(420.1±30.8)pg/ml,(320.1±30.8)pg/ml;(6.2±1.9)pg/ml,(7.0±2.0)pg/ml,P<0.01]3h和6hIL-6、TNF-α水平升高;與MIRI模型組[(596.6±88.2)pg/ml,(686.2±110.2)pg/ml;(87.3±16.1)pg/ml,(100.3±24.1)pg/ml,P<0.01]相對(duì)照,MIRI瘦素預(yù)處理組3h和6hIL-6、TNF-α水平降低

6、。與假手術(shù)組[(1.54±0.70)ug/g,(1.61±0.81)ug/g;(2.61±1.12)ug/g,(2.73±1.52)ug/g,P<0.05]相對(duì)照,MIRI瘦素預(yù)處理組[(8.39±4.19)ug/g,(9.21±4.56)ug/g;(14.59±2.68)ug/g,(16.01±3.15)ug/g,P<0.05]3h和6h心肌、血清瘦素水平升高;與MIRI模型組[(16.02±4.22)ug/g,(18.02±5.20

7、);(31.76±6.10)ug/g,(36.11±6.88),P<0.01]相對(duì)照,MIRI瘦素預(yù)處理組3h和6h心肌、血清瘦素水平降低。
　　2.心肌冷/熱缺血再灌注損傷兩組對(duì)照比較,小鼠血清心肌肌鈣蛋白I、心肌MPO活性、血清細(xì)胞炎性因子TNF-α,IL-1β,IL-6水平無明顯差異(P>0.05)。
　　3.茶多酚可顯著降低心肌組織瘦素水平(P<0.01),減輕NOX-4mRNA表達(dá)(P<0.01),降低MPO活性(

8、P<0.01),減少H2O2、MDA含量(P<0.01)并升高SOD活性(P<0.01)。
　　結(jié)論:1.瘦素預(yù)處理可減輕小鼠缺血心肌中炎性細(xì)胞因子IL-6、TNF-α的表達(dá),從而可能達(dá)到心肌保護(hù)的作用。
　　2.瘦素預(yù)處理雖然可以減輕心肌冷/熱缺血再灌注損傷,減輕炎癥反應(yīng),但是對(duì)小鼠心肌冷/熱缺血再灌注損傷之間的差異性無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　3.茶多酚可能通過降低瘦素水平、減少中性粒細(xì)胞的聚集與浸潤以及活性氧(ROS)的