納洛酮對(duì)體外心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的：缺血性心臟病是威脅人類健康的主要疾病之一。再灌注損傷在在疾病的發(fā)生中起著重要的作用，在心肌缺血再灌注損傷中心肌存在凋亡和壞死兩種形式，近年來(lái)研究表明心肌細(xì)胞的凋亡是缺血再灌注損傷中的主要存在形式。線粒體膜電位的喪失是凋亡早期的一個(gè)顯著的特征。線粒體膜受損，致使細(xì)胞色素C及一些凋亡誘導(dǎo)因子的釋放，細(xì)胞色素C通過(guò)激活caspase酶系，最終激活caspase-3誘導(dǎo)凋亡。納洛酮(Nalxone，NAL)是內(nèi)源性阿片樣受體的特異性結(jié)抗劑

2、，近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，它對(duì)缺血再灌注心肌具有保護(hù)作用，其保護(hù)性機(jī)制未完全闡明。本實(shí)驗(yàn)以大鼠離體心肌缺血再灌注模型，在心肌缺血再灌注損傷引起的心肌細(xì)胞凋亡變化的基礎(chǔ)上，研究納洛酮對(duì)大鼠離體心肌缺血再灌注損傷的影響，并探討其可能的相關(guān)機(jī)制。 方法 用Langendorff裝置對(duì)大鼠進(jìn)行離體心臟灌流，制作離體心臟缺血再灌注損傷模型，Wistar大鼠60只，隨機(jī)分成3組，即對(duì)照組、缺血再灌注祖、納洛酮處理組；對(duì)照組：用氧飽和的正常臺(tái)

3、式液恒溫、恒壓下對(duì)大鼠離體心臟進(jìn)行持續(xù)灌流105分鐘，灌流量6～8ml/min；缺血再灌注組(灌流條件同對(duì)照組)：離體心臟預(yù)灌15分鐘，夾閉臺(tái)式液通道造成全心缺血缺氧30分鐘，之后恢復(fù)灌流60分鐘；納洛酮處理組：離體心臟預(yù)灌15分鐘(此時(shí)液體是含有納絡(luò)酮的氧飽和液，其他條件同缺血再灌注組)，缺血30分鐘，之后恢復(fù)灌流60分鐘，每組取10只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分離心肌細(xì)胞用于線粒體膜電位的變化，余下的10只動(dòng)物的心臟組織固定、常規(guī)石蠟包埋進(jìn)行免疫組化

4、染色檢測(cè)caspase-3表達(dá)的變化。 結(jié)果 三組大鼠心肌細(xì)胞線粒體膜電位下降的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)分別是(17.49±1.57)％、(40.38±3.10)％、(23.19±3.14)％，納洛酮處理組線粒體膜電位下降的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)明顯高于缺血再灌注組(P<0.05)，與對(duì)照組無(wú)明顯差別(P>0.05)。免疫組化染色結(jié)果顯示納洛酮可以抑制caspase-3的表達(dá)，缺血再灌注組caspase-3表達(dá)明顯高于納洛酮處理組和對(duì)照組(P<0