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1、目的:觀察益氣活血方藥對(duì)D-半乳糖(D-gal)擬衰老的大鼠免疫器官、免疫細(xì)胞及大腦皮層SOD、MDA的影響,探討其作用機(jī)理。 方法:健康雄性SD大鼠64只(3月齡,體重200g-250g),按體重隨機(jī)分為8組,即空白組(Ⅰ組)、模型組(Ⅱ組)、益氣藥大劑量(Ⅲ組)組、益氣藥小劑量組(Ⅳ組)、活血藥大劑量組(Ⅴ組)、活血藥小劑量組(Ⅵ組)、益氣活血大劑量組(Ⅶ組)、益氣活血小劑量組(Ⅷ組),每組8只。 模型組按文獻(xiàn)所述用
2、5%D-半乳糖(D-gal)生理鹽水溶液,腹腔注射,0.1ml/100g體重,1次/d,連續(xù)50天造衰老模型??瞻捉M每天腹腔注射生理鹽水0.1ml/100g,連續(xù)50天。結(jié)果顯示,與空白組相比模型組的胸腺、脾臟重量明顯減小(P<0.01),CD4/CD8比值減小(P<0.01),大腦皮層SOD活性降低(P<0.01),MDA含量增高(P<0.01),機(jī)體衰老指征明顯,提示造模成功。 在造模基礎(chǔ)上,同時(shí)用制備好的益氣藥大劑量(4.
3、44g/kg.d),益氣藥小劑量(0.74g/kg.d),活血藥大劑量(3.91g/kg.d),活血藥小劑量(0.65g/kg.d),益氣活血大劑量(8.34g/kg.d),益氣活血小劑量(1.39g/kg.d)灌胃,每十天測(cè)體重一次,調(diào)整灌胃劑量,連續(xù)50天。 末次給藥后2小時(shí),斷尾法采血液標(biāo)本,處理后上流式細(xì)胞儀檢T細(xì)胞亞群。同時(shí)脫頸椎處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物摘取脾臟、胸腺稱重。在冰臺(tái)上摘取大腦皮層用冷勻漿介質(zhì)研磨配成組織勻漿,按試劑盒
4、所述操作檢測(cè)大腦皮層SOD、MDA。 結(jié)果:與模型組相比給藥各組胸腺和脾臟重量均有增加(P<0.01)。其中益氣活血藥的大劑量組的作用明顯優(yōu)于其它給藥組(P<0.05)。益氣藥大劑量組對(duì)胸腺、脾臟的增重作用優(yōu)于活血藥的大、小劑量組,說(shuō)明益氣藥對(duì)免疫器官的作用大于活血藥。 大腦皮層SOD、MDA的檢測(cè),與模型組相比給藥各組均顯著提高大腦皮層SOD活性(P<0.01)。其中益氣活血藥的大、小劑量組作用有差別(P<0.05),
5、小劑量的益氣活血藥的作用優(yōu)于大劑量(P<0.05),其余各給藥組之間作用無(wú)差別(P>0.05)。說(shuō)明單獨(dú)使用益氣藥或活血藥均有提高大腦皮層SOD活性的作用,但其效果不如同時(shí)使用二者顯著。與模型組相比給藥各組均能降低機(jī)體MDA的含量(P<0.01),但作用有差別。其中益氣活血藥的作用優(yōu)于其它藥物組,益氣活血藥的小劑量組比大劑量組明顯,其他各給藥組之間統(tǒng)計(jì)學(xué)上作用無(wú)差別。提示臨床應(yīng)用時(shí)一味加大君藥的劑量來(lái)增加療效是不可取得。 模型組
6、與空白組相比CD4顯著降低,與老年機(jī)體相似,提示造模成功。與模型組相比給藥各組CD4均升高(P<0.05-0.01),其中益氣活血藥大劑量組效果最顯著(與其它給藥組相比P<0.05)。小劑量的益氣活血藥組與益氣藥大劑量組作用無(wú)差別(P>0.05),與剩余給藥組均有差別(P<0.01)。益氣藥大劑量組與益氣藥小劑量組、活血藥大劑量組、活血藥小劑量組有差別。這說(shuō)明益氣藥大劑量的作用相當(dāng)于小劑量益氣活血藥合用,提示益氣藥對(duì)免疫細(xì)胞的影響優(yōu)于活
7、血藥,說(shuō)明益氣活血方藥對(duì)免疫系統(tǒng)的作用主要是由益氣藥產(chǎn)生的。從CD8的檢測(cè)中可以看出,與模型組相比活血藥大劑量組、活血藥小劑量組、益氣藥小劑量組這三組的CD8均減少,但差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與模型組相比,益氣藥大劑量組、益氣活血藥大劑量組、益氣活血藥小劑量組這三組均使CD8降低,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。對(duì)CD4/CD8的比值作統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,發(fā)現(xiàn)空白組CD4/CD8的比值高于其它各組,與模型組相比活血藥小劑量組、益氣藥小劑量組、活血藥
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