血必凈注射液對膿毒癥大鼠急性肺損傷治療作用的實驗研究.pdf

1、目的:本研究通過建立膿毒癥(sepsis)大鼠急性肺損傷模型,觀察肺臟病理學變化、核因子kappa B(NF-kB)的表達及血清活化蛋白C(APC)和腫瘤壞死因子-α(TNF-V)濃度的變化,通過觀察血必凈注射液對血清APC和TNF-α肺臟組織NF—kB表達的影響,進一步探討膿毒癥肺損傷的病理生理機制及血必凈注射液的治療作用。
　　 方法:健康成年Spragne-Dawley(SD)大鼠136只,雌雄各半,隨機分為4組:空白對照

2、組(A組)24只、假手術組(B組)24只、膿毒癥組(C組)44只、血必凈治療組(D組)44只。本實驗采用盲腸結扎穿孔法(CLP)制作膿毒癥大鼠模型。每組動物按照時間點分為6、24、48、72小時4個亞組。D組于術后0小時和每隔12小時經尾靜脈注射血必凈注射液8ml/kg,B組和C組于相應時間點經尾靜脈注射等量生理鹽水。在CLP術畢開始計時,于相應時間點將動物麻醉后,經腹主動脈采血測定血清TNF-α和APC水平,取右肺下葉行蘇木素-伊紅(

3、HE)染色觀察病理形態(tài)學變化,免疫組化檢測NF—kB的表達。
　　 結果:
　　 1術后一般情況的觀察:B組大鼠蘇醒較早,剖腹未見惡臭、腹腔水腫及腸管壞死等表現(xiàn)。C組大鼠術后均有嚴重的膿毒癥表現(xiàn):蘇醒延遲,逐漸出現(xiàn)精神萎靡,豎毛及呼吸困難等表現(xiàn),剖腹可見惡臭味血性滲液,腸管水腫粘連,盲腸壞死變黑。D組大鼠與C組相比,臨床表現(xiàn)明顯減輕。
　　 2病理觀察:A組肺組織結構完整,肺泡間隔無水腫和充血,肺泡腔無炎性細胞浸

4、潤。B組與A組無明顯差異。C組可見肺泡腔充血、纖維蛋白滲出,肺泡腔內可見中性粒細胞、紅細胞、淋巴細胞等大量炎性細胞浸潤,血管、氣管周圍有不同程度的間質充血,水腫和肺大皰形成,24小時達頂峰,其后無緩解趨勢。D組也出現(xiàn)了上述表現(xiàn),但程度減輕。
　　 3 APC測定:C組于CLP6小時后血清APC含量開始下降,與A組、B組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；隨著時間延長,APC含量呈逐漸下降趨勢。D組于6小時后,較C組升高,差異有

5、統(tǒng)計學意義(P<0.05):在24和48小時與C組比較差異不再有統(tǒng)計學意義,但依然有升高趨勢。D組血清APC含量在各時間點均較A組、B組降低,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　 4 TNF-α測定:C組血清TNF-α濃度于CLP后6-72小時逐漸升高,與A組、B組相比,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。D組血清TNF-α濃度在各時間點均顯著降低,與C組相比,差異均具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。D組各時間點血清TNF-α濃

6、度均較A組、B組升高,差異均具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　 5肺組織NF-kB表達:A、B組偶見NF-kB陽性細胞； C組于術后6小時可以觀察到NF-κB表達,48小時達高峰,并持續(xù)到72小時,C組表達量與A組、B組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。D組表達量在相同時間點均低于C組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；D組表達量在各時間點均高于A組、B組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　 6大鼠死亡情況

7、:A組與B組大鼠72小時內無死亡。C組大鼠44只中共死亡13只(病死率29.55％),D組44只中共死亡5只(病死率11.36％)。C組病死率較D組升高,二者具有統(tǒng)計學差異(X2=4.47,P<0.05)。
　　 結論:
　　 1 CLP法能夠成功復制大鼠膿毒癥模型。
　　 2膿毒癥大鼠血清TNF-α水平升高,APC水平降低；肺組織NF-kB表達增強。表明膿毒癥時炎癥反應對PC通路具有抑制作用。
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