菟絲子炮制前后化學成分的比較研究.pdf

1、目的:本課題圍繞菟絲子炮制前后化學成分變化進行比較研究,并對菟絲子鹽制品和酒制品炮制技術(shù)及菟絲子質(zhì)量標準進行規(guī)范化研究。研究使用的菟絲子藥材來源為旋花科植物菟絲子CuscutachinensisLam.的干燥成熟種子。本實驗主要是通過比較研究菟絲子炮制前后總成分和單一成分變化,確定菟絲子飲片炮制前后化學成分的改變,探討菟絲子的炮制原理;根據(jù)不同炮制方法及炮制工藝對其化學成分的影響,篩選出鹽制和酒制工藝,初步建立菟絲子飲片質(zhì)量標準;建立鹽

2、制菟絲子飲片HPLC指紋圖譜,并對炮制前后的變化進行對比研究;為菟絲子酒制、鹽制炮制規(guī)范化提供實驗數(shù)據(jù),為中醫(yī)臨床正確應(yīng)用菟絲子炮制品提供依據(jù),從而提高和保證飲片質(zhì)量,保證臨床用藥安全有效。
　　方法:采用紫外分光光度法,以提取溫度,提取溶劑用量,提取時間為因素,選取不同水平,分別以總黃酮,總多糖為指標,篩選出提取條件,測定菟絲子鹽制品與酒制品不同烘制溫度,烘制時間,悶潤時間,以及酒制品不同黃酒用量中總黃酮,總多糖的含量;采用高效

3、液相法,確定菟絲子中槲皮素的提取方法,測定菟絲子鹽制品與酒制品不同烘制溫度,烘制時間,悶潤時間,以及酒制品不同黃酒用量中槲皮素的含量,比較不同炮制因素對菟絲子鹽制與酒制品中總成分與單一成分含量的影響;以烘制溫度,烘制時間,悶潤時間為因素,選取不同水平,以槲皮素為指標,篩選出鹽制與酒制炮制條件,從而優(yōu)選出菟絲子鹽制與酒制炮制工藝;采用HPLC法建立鹽制菟絲子飲片指紋圖譜;比較菟絲子生品、鹽制菟絲子、酒制菟絲子、炒黃菟絲子和水煮菟絲子指紋圖

4、譜在峰位置、數(shù)量及峰面積上的區(qū)別;以乙醚為提取溶劑,測定菟絲子生品、鹽制菟絲子、酒制菟絲子、炒黃菟絲子和水煮菟絲子脂肪油含量;按照藥典法測定菟絲子生品與其炮制品水分、水溶性浸出物、醇溶性浸出物;采用HPLC法建立測定菟絲子中酚酸類成分綠原酸,黃酮類成分金絲桃苷、蘆丁、槲皮素和山奈素5種單一成分含量的方法,比較生品與不同炮制品中5種成分含量的變化。
　　結(jié)果:通過正交試驗篩選出菟絲子總黃酮提取工藝為85℃水浴用95％乙醇40ml水浴

5、回流提取2次,每次提取2h;總多糖的提取工藝為100℃水浴加水30ml水浴回流提取2次,每次3h;不同炮制因素對菟絲子總黃酮、總多糖、槲皮素的含量均有影響,菟絲子炮制后總黃酮含量下降,總多糖和槲皮素含量明顯升高,炮制溫度與其它炮制因素相比更為顯著;菟絲子鹽制工藝為悶潤1h,放入烘箱160℃烘制60min;酒制工藝為每100g菟絲子藥材加入30ml黃酒悶潤1h,放入烘箱160℃烘制60min;菟絲子炮制后在峰保留時間、峰數(shù)目上沒有太大改變

6、,但在峰面積上有一定的變化,鹽制,酒制與炒黃后酚酸類成分和黃酮類成分峰面積比生品峰面積明顯降低,但其中槲皮素與山奈素峰面積明顯升高。水煮后酚酸類成分與黃酮類成分峰面積與生品相比降低不多,且槲皮素與山奈素峰面積升高也不明顯;菟絲子飲片水分含量均不超過9.0%;水浸出物的含量均不超過29.0%,醇浸出物的含量均不超過14.0%;生品中脂肪油平均含量為5.97%,炮制后菟絲子脂肪油的平均含量在5.21%～6.61%之間;綠原酸、金絲桃苷、蘆丁

7、、槲皮素和山奈素的含量生品中平均含量為2.11mg/g、2.35mg/g、0.55mg/g、0.04mg/g、0.13mg/g,鹽制品中平均含量為0.86mg/g、0.90mg/g、0.31mg/g、0.55mg/g、0.27mg/g,酒制品中平均含量為0.80mg/g、0.77mg/g、0.30mg/g、0.49mg/g、0.23mg/g,清炒品中平均含量為1.06mg/g、0.92mg/g、0.31mg/g、0.49mg/g、0.1

8、9mg/g,水煮品中平均含量為1.43mg/g、1.68mg/g、0.40mg/g、0.06mg/g、0.29mg/g。
　　結(jié)論:炮制的程度與藥材中有效成分的含量相關(guān);菟絲子炮制后發(fā)現(xiàn)化學成分的含量發(fā)生了明顯改變,首次發(fā)現(xiàn)菟絲子炮制對槲皮素含量有顯著影響;菟絲子不同炮制品槲皮素含量與烘制溫度和烘制時間呈正相關(guān),炮制能提高槲皮素的含量;首次以槲皮素為指標確定菟絲子鹽制和酒制工藝;菟絲子生品不易粉碎且煎出率較低,而鹽制,酒制后槲皮素