miR-499,miR-196a2,miR-149單核苷酸多態(tài)性與系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的關(guān)聯(lián)性研究.pdf

1、目的：
　　分別比較 SLE患者和正常對(duì)照之間，RA患者和正常對(duì)照之間 miR-499，miR-196a2及miR-149的多態(tài)性位點(diǎn)的rs2292832、rs11614913、rs3746444等位基因和基因型頻率分布的差異。探討系統(tǒng)性紅斑狼瘡（Systemic lupus erythematosus,SLE）與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（(rheumatoid arthritis，RA)患者發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)與miR-499,miR-196a2及m

2、iR-149單核苷酸多態(tài)性的關(guān)聯(lián)性，以及與自身抗體，器官受累情況等臨床參數(shù)之間的關(guān)系。
　　方法：
　　120例SLE患者、200例RA患者為南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京醫(yī)院風(fēng)濕免疫科的門診和住院患者，所有患者均符合1997年美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)修訂的SLE分類標(biāo)準(zhǔn)及1987年美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)修訂的RA分類標(biāo)準(zhǔn)，并由兩名副主任以上級(jí)別的專科醫(yī)生確診。健康對(duì)照組不具備SLE及RA診斷標(biāo)準(zhǔn)中的任何一條、本人及其直系親屬無(wú)自身免疫性疾病史、最近一

3、個(gè)月內(nèi)身體健康、未使用激素和免疫抑制劑等藥物、以及無(wú)重大疾病史的健康志愿者共120例。在獲取研究對(duì)象知情同意后，抽取2ml外周靜脈血，提取基因組DNA。利用PCR-RFLP技術(shù)對(duì)研究對(duì)象miR-499 rs2292832、miR-196a2 rs11614913、miR-149 rs3746444的SNP進(jìn)行檢測(cè)。統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS17.0軟件，符合正態(tài)分布的定量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，X2檢驗(yàn)用于計(jì)數(shù)資料的分析，t檢驗(yàn)用于兩組間計(jì)

4、量資料的分析，Logistic回歸分析用于計(jì)算校正性別、年齡等因素后的OR值和P值。計(jì)算采用SPSS17.0軟件。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α＝0.05.
　　結(jié)果：
　?。?）基因單核苷酸多態(tài)性與SLE遺傳易感性的關(guān)聯(lián)
　　miR-196a2 rs11614913表現(xiàn)為TT,TC,CC三種基因型，SLE組和對(duì)照組基因型頻率分別為10.8％/15.8%,22.5%/27.5%,66.7%/56.7%,與 miR-196a2基因型TT+T

5、C相比，基因型為 CC的患者發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增加,OR=1.28,95%CI(1.03-1.84)，P=0.017.即miR-196a2的多態(tài)性與SLE患者發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)。
　　miR-149 rs22928323表現(xiàn)為TT,TC,CC三種基因型，SLE和對(duì)照組基因型頻率分別為25.2%/27.5%，28%/21.7%,46.8%/50.8%，與miR-149基因型TT+TC相比，基因型為 CC的患者發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)不增加，OR=0.61,95%C

6、I(0.38-1.38),P=0.283,即miR-149基因多態(tài)性與SLE的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)不相關(guān)。
　　miR-499 rs3746444表現(xiàn)為AA,AG,GG三種基因型，SLE和對(duì)照組基因型頻率分別為19.8%/18.3%,29.7%/29.2%,50.5%/52.5%,與miR-449基因型AA+AG相比，基因型為GG的患者發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)不增加，OR=0.78,95%CI(0.58-1.11),P=0.188，即miR-499基因多態(tài)性

7、與SLE的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)不相關(guān)。
　　（2）基因單核苷酸多態(tài)性與RA遺傳易感性的關(guān)聯(lián)
　　miR-196a2 rs11614913的三種基因型TT,TC,CC在RA患者與健康對(duì)照組的基因型分別為26.9%/21.6%，21.5%/26.7%,51.6%/51.7%,與 miR-196a2基因型TT+TC相比，基因型為CC的患者發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)不增加，OR＝0.69，95%CI(0.24-1.18)，P=0.248。
　　miR-14

8、9 rs22928323的三種基因型TT,TC,CC在RA患者與健康對(duì)照組的基因型分別為25.3%/22.5%,51.1%/26.7%,23.6%/50.8%,與 miR-149基因型 TT+TC相比，基因型為CC的患者發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增加，OR＝1.38，95%CI(1.01-1.75),P=0.023。即miR-149 rs22928323點(diǎn)突變與RA的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)。
　　miR-499 rs3746444表現(xiàn)為AA,AG,GG三種基

9、因型，SLE和對(duì)照組基因型頻率分別為12.9%/18.3%,19.9%/20.0%,67.2%/61.7%,與miR-449基因型AA+AG相比，基因型為 GG的患者發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)不增加，OR=0.75,95%CI(0.54-1.17),P=0.159.即miR-499 rs3746444點(diǎn)突變與RA的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)不相關(guān)
　　（3）基因單核苷酸多態(tài)性與SLE臨床參數(shù)的關(guān)聯(lián)
　　SLE患者三個(gè)miRNA位點(diǎn)基因型之間的anti-ANA，

10、anti-dsDNA，anti-Sm，anti-ACA,PLT，C3,C4均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。
　　（4）基因單核苷酸多態(tài)性與RA臨床參數(shù)的關(guān)聯(lián)
　　RA患者三個(gè)miRNA位點(diǎn)基因型之間的AKA，CCP，RF，WBC，BUN，Cr均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）.
　　結(jié)論：
　　(1)miR-196a2內(nèi)的SNP rs11614913與中國(guó)華東地區(qū)漢族人群SLE的遺傳易感性有關(guān)；
　　(2)mi