CXCR4結(jié)合多肽標(biāo)記超微超順磁性納米氧化鐵顆料在裸鼠胰腺癌模型中的在體磁共振成像研究.pdf

1、目的:體外驗(yàn)證Pep12-USPIO對(duì)人胰腺癌細(xì)胞的靶向成像能力。研究Pep12-USPIO、USPIO在健康裸鼠體內(nèi)的磁共振成像及組織分布規(guī)律。評(píng)價(jià)Pep12-USPIO在人胰腺癌裸鼠皮下移植瘤模型中的靶向成像能力。
　　方法:使用納米粒度儀測(cè)定Pep12-USPIO、USPIO的水和直徑、Zeta電位。將Pep12-USPIO及USPIO稀釋成一系列濃度梯度后行磁共振掃描，評(píng)價(jià)體外磁共振成像能力。在含血清培養(yǎng)基體系中，將人胰腺

2、癌細(xì)胞BxPC-3、PANC-1分別與Pep12-USPIO、USPIO共孵育，采用普魯士藍(lán)鐵染色法觀察鐵顆粒與細(xì)胞特異性結(jié)合能力。同法將上述兩種細(xì)胞與Pep12-USPIO、USPIO共孵育后行體外磁共振掃描，評(píng)價(jià)體外靶向成像能力。將不同劑量的Pep12-USPIO、USPIO分別經(jīng)尾靜脈注射健康裸鼠，在打藥前、大藥后即刻(0h)、2h、6h、12h、18h、24h、48h行磁共振掃描，測(cè)定各臟器T2值隨時(shí)間的變化，在24h、48h分

3、別收集裸鼠臟器行普魯士藍(lán)鐵染色檢查明確鐵的組織分布。分別用人胰腺癌細(xì)胞BxPC-3、PANC-1建立荷人胰腺癌裸鼠皮下移植瘤模型;以USPIO為對(duì)照，將不同劑量Pep12-USPIO經(jīng)尾靜脈注射荷瘤裸鼠后于上述時(shí)間點(diǎn)行裸鼠磁共振掃描，測(cè)定腫瘤區(qū)T2值隨時(shí)間的變化，于24h、48h收集腫瘤組織行普魯士藍(lán)鐵染色，留取一部分腫瘤行CXCR4免疫組化。
　　結(jié)果:Pep12-USPIO、USPIO水合直徑分別為64.47±0.24nm、4

4、0.27±0.08nm;其Zeta電位分別為-3.65±0.02mV、-1.85±0.44。Pep12-USPIO、USPIO的△R2值與鐵濃度呈線性關(guān)系，具備體外磁共振成像能力。BxPC-3、PANC-1與Pep12-USPIO、USPIO孵育后普魯士藍(lán)鐵染色顯示Pep12-USPIO可與細(xì)胞特異性結(jié)合，磁共振掃描顯示Pep12-USPIO可在體外細(xì)胞株水平靶向性成像。健康裸鼠注射USPIO及Pep12-USPIO后主要引起肝臟T2值

5、明顯下降，強(qiáng)化維持48h，當(dāng)劑量大于等于200μmolFe/Kg時(shí)肝臟T2不會(huì)進(jìn)一步降低，腎臟、肌肉、腦部T2值于注射后短期內(nèi)恢復(fù)，臟器普魯士藍(lán)鐵染色顯示鐵顆粒主要分布在肝、脾、淋巴結(jié)，腎、心肺、肌肉、腦組織中一般沒(méi)有鐵顆粒分布，當(dāng)USPIO達(dá)1000μmolFe/Kg時(shí)腎、肌肉可有少量鐵顆粒分布。以USPIO為對(duì)照，Pep12-USPIO對(duì)荷人胰腺癌裸鼠腫瘤區(qū)T2值的影響與USPIO無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。腫瘤鐵染色顯示腫瘤組織