GnT-V和CXCR4在胰腺癌轉(zhuǎn)移中的作用.pdf

1、研究背景：胰腺癌是一種治療效果差，死亡率高的疾病，外科手術(shù)切除仍是主要的治愈手段，但總的手術(shù)切除率低，根治性切除后的中位生存期只有17-20個(gè)月，在行手術(shù)的患者中約40％已達(dá)局部晚期，50％以上已有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。僅少數(shù)患者屬早期，施行根治術(shù)后，5年生存率僅在15％-25％。故胰腺癌的治療面臨著嚴(yán)峻的問(wèn)題。因此，有人稱胰腺痛為“癌中之王”，被國(guó)際醫(yī)學(xué)界列為“21世紀(jì)的頑固堡壘”。為研究胰腺癌的生物學(xué)特性，尋求新的輔助治療方法，近年來(lái)對(duì)胰腺癌的

2、分子生物學(xué)研究極為重視。細(xì)胞內(nèi)糖蛋白的糖鏈在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體中通過(guò)糖基轉(zhuǎn)移酶和糖營(yíng)酶加工而形成。糖蛋白糖鏈最常見(jiàn)的變化是N-糖鏈分子量大小和分支數(shù)變化，這歸因于N-乙酸氨基葡萄糖轉(zhuǎn)移酶v(GnT-V)的過(guò)表達(dá)。GnT-V是分布在高爾基體中的合成糖蛋白N-糖鏈分支結(jié)構(gòu)的關(guān)鍵酶，催化形成N-糖鏈的GleNAcβ1，6分支結(jié)構(gòu)。近來(lái)大量報(bào)道，在乳腺癌、結(jié)腸癌、肝癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤等惡性腫瘤中大量表達(dá)由GnT-V及其產(chǎn)物β1，6分支分支結(jié)構(gòu)，并與腫

3、瘤細(xì)胞侵襲和遷移密切相關(guān)。己證實(shí)趨化因子(Chemokines)在為炎癥細(xì)胞提供遷移信號(hào)、并使之活化、進(jìn)而啟動(dòng)其定向移動(dòng)并使之準(zhǔn)確定位中扮演著至關(guān)重要的角色。近年來(lái)研究表明，許多腫瘤細(xì)胞可以限定性地表達(dá)某些趨化因子或趨化因子受體，并且存在著趨化因子信號(hào)途徑失調(diào)控，提示趨化因子及其受體可能通過(guò)與炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)相似的機(jī)制參與了腫瘤的發(fā)展、惡化和侵襲轉(zhuǎn)移。且有研究表明，趨化因子受體4(CXCR4)在結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移組織中表達(dá)顯著升高，并認(rèn)為CXCR

4、4是器官靶向轉(zhuǎn)移關(guān)鍵因子。 目的：研究GnT-V和CXCR4在裸鼠胰腺癌模型(MIAPaCa-2細(xì)胞系)轉(zhuǎn)移中的作用；研究GnT-V在人胰腺癌標(biāo)本中的表達(dá)及其與胰腺癌侵襲和轉(zhuǎn)移的關(guān)系。 方法：本研究利用胰腺癌細(xì)胞MIAPaCa-2建立了裸鼠原位胰腺癌模型，應(yīng)用PCR、cDNA芯片和免疫組化技術(shù)槍測(cè)出GnT-V和CXCR4在該細(xì)胞系及移植瘤中的表達(dá)情況，并進(jìn)一步通過(guò)基因轉(zhuǎn)染技術(shù)、Transwell實(shí)驗(yàn)和免疫組化技術(shù)研究了G

5、nT-V和ICXCR4胰腺癌模型和人胰腺癌轉(zhuǎn)移中的不同作用，為臨床治療胰腺癌，改善預(yù)后提供一定的理論依據(jù)。 結(jié)果：建成裸鼠原位胰腺癌模型；通過(guò)RT-PCR、cDNA基因芯片等方法證實(shí)：MiaPaCa-2細(xì)胞系中GnT-V基因表達(dá)陽(yáng)性，而無(wú)CXCR4、GnT-III表達(dá)；利用基因轉(zhuǎn)染、Tranwell技術(shù)證實(shí)在胰腺癌轉(zhuǎn)移過(guò)程中，GnT-V的表達(dá)在決定腫瘤的轉(zhuǎn)移能力方面起到重要作用，而CXCR4的表達(dá)則決定著胰腺癌靶向肝轉(zhuǎn)移；運(yùn)用免