超順磁性氧化鐵和DAPI雙標(biāo)記骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞.pdf

1、目的:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞目前已經(jīng)成為重要的組織工程種子細(xì)胞,而若想深入研究MSCs在體內(nèi)外增殖、分化的規(guī)律首先需要解決如何能高效、安全地標(biāo)記MSCs問(wèn)題。本文通過(guò)觀察SPIO及DAPI對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的雙標(biāo)記效果及其對(duì)細(xì)胞存活、增殖以及凋亡的影響,為間充質(zhì)干細(xì)胞的活體示蹤研究奠定基礎(chǔ)。
　　 方法:分離培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,用SPIO及DAPI雙標(biāo)記后分別用普魯士藍(lán)染色法和激光共聚焦顯微鏡觀察其鐵標(biāo)記率及熒光標(biāo)記率。用臺(tái)

2、盼藍(lán)檢測(cè)細(xì)胞活力；MTT法檢測(cè)標(biāo)記干細(xì)胞增值力；Calcein-AM／PI以及AO／PI雙染細(xì)胞,檢測(cè)細(xì)胞存活率以及凋亡率。
　　 結(jié)果:SPIO及DAPI在體外雙標(biāo)記大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞效率高,幾乎達(dá)100％;臺(tái)盼藍(lán)染色顯示標(biāo)記細(xì)胞的存活率為97％；MTT法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)雙標(biāo)記干細(xì)胞組的活力以及增殖力與未標(biāo)記干細(xì)胞組相比差異均無(wú)顯著性意義(P>0.05)；Calcein-AM／PI染色,未標(biāo)記細(xì)胞及雙標(biāo)記細(xì)胞的存活率分別為96％和9