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文檔簡介
1、目的:利用超小超順磁性氧化鐵顆粒(USPIO)標記SD大鼠脂肪來源干細胞(ADSCs),探討標記的有效性及安全性,并從體外和體內(nèi)水平探究MR對標記細胞進行成像示蹤的可行性。
方法:使用含USPIO(40μg/ml)和多聚賴氨酸(PLL,1.5μg/ml)的培養(yǎng)基與ADSCs共孵育培養(yǎng)24h,標記后行普魯士藍染色和透射電鏡觀察鐵顆粒在細胞內(nèi)的分布,行臺盼藍染色和MTS實驗測定標記對細胞活力和增殖能力的影響,應用ELISA法比
2、較標記細胞和對照組培養(yǎng)液中血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)含量。體外條件下,通過T2 map和T2*map序列研究不同數(shù)量標記細胞與MR信號參數(shù)(T2、T2*、R2和R2*)之間相關(guān)性?;铙w條件下,開胸結(jié)扎冠脈前降支(LAD)建立SD大鼠急性心梗模型,通過尾靜脈和心肌局部注射分別移植標記細胞,利用MR進行標記細胞的活體示蹤成像。取病理行普魯士藍染色觀察USPIO顆粒在各臟器分布情況。
結(jié)果:體外普魯士藍染色顯示USPIO標記A
3、DSCs的陽性率為99%,透射電鏡提示USPIO顆粒主要位于胞質(zhì)內(nèi)溶酶體中。臺盼藍染色實驗顯示活細胞數(shù)大于95%,MTS實驗提示USPIO濃度為10、20、40、80和160μg/ml時不影響ADSCs增殖。ELISA法顯示標記細胞和對照組培養(yǎng)液中VEGF含量與細胞數(shù)量呈正相關(guān),組間無顯著差異。體外MR成像可敏感顯示USPIO標記細胞,通T2 map序列及T2*map序列可以進行T2和T2*定量測量,R2和R2*值與標記細胞數(shù)量之間呈線
4、性相關(guān)。呼吸機輔助通氣條件下通過開胸結(jié)扎冠脈前降支(LAD)可成功建立SD大鼠急性心梗模型。尾靜脈途徑移植標記細胞可在肝臟首先觀察到信號強度減低,心肌信號強度無顯著改變;通過心肌直接注射標記細胞可在MR觀察到注射區(qū)域信號強度明顯降低。普魯士藍染色提示兩種標記途徑可在梗死心肌附近發(fā)現(xiàn)局灶性分布的USPIO顆粒,但大部分顆粒分布于脾臟中。
結(jié)論:
1、使用USPIO(40μg/ml)和PLL(1.5μg/ml)可
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