脫脂麥胚發(fā)酵工藝及其提取物生物活性研究.pdf

1、小麥是世界上種植最廣泛的糧食作物之一，全世界約有35％～40％的人口將小麥作為主要糧食作物。現(xiàn)代食品科學和營養(yǎng)學研究表明，小麥胚芽中不僅含有豐富優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)、脂肪、維生素、礦物質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)，還含有一些生物活性物質(zhì)。已有研究表明在對小麥胚芽進行發(fā)酵后，發(fā)酵提取物中的生物活性物質(zhì)含量明顯增多，但目前國內(nèi)對小麥胚芽的發(fā)酵研究較少，且主要集中在小麥胚芽發(fā)酵食品上，對小麥胚芽發(fā)酵提取物中的生物活性物質(zhì)則基本沒有研究。小麥胚芽的α—淀粉酶活力很高，

2、與大麥胚芽相當，這為用小麥胚芽做為發(fā)酵原料進行發(fā)酵提供了充分的條件。 論文以脫脂小麥胚芽(以下簡稱脫脂麥胚)為發(fā)酵原料，篩選適合脫脂麥胚發(fā)酵的菌種，確定了最優(yōu)的發(fā)酵條件，同時研究了脫脂麥胚發(fā)酵提取物的抗氧化活性、抑菌活性和抗腫瘤活性。論文的主要研究結(jié)果如下： 1．建立一種檢測脫脂麥胚發(fā)酵提取物中2，6—二甲氧基對苯醌的高效液相色譜檢測方法。色譜條件：色譜柱：shim—packVP—ODS(250mm×4.6mm，5μm)

3、，流動相采用V(甲醇)：V(水)=75：25，流速1.0mL/min，進樣量10μL，柱溫30℃，檢測波長288nm。 2．以脫脂麥胚發(fā)酵提取物中2，6—二甲氧基對苯醌含量為評價指標，繪制單菌株產(chǎn)2，6—二甲氧基對苯醌曲線，從中篩選出最適合小麥胚芽發(fā)酵的菌株，最終確定最優(yōu)的發(fā)酵菌株是安琪耐高溫釀酒高活性干酵母，通過單因素試驗和正交試驗評價五株安琪系列釀酒酵母的發(fā)酵性能，最佳的發(fā)酵條件為：麥胚(W)：水(V)=1：14；麥胚(W)

4、：菌種(W)=3：1；發(fā)酵時間為36h：發(fā)酵溫度為30℃。 3．測定了脫脂麥胚發(fā)酵提取物對DPPH自由基、羥基自由基、超氧陰離子自由基的清除作用并采用同步熒光法測定了發(fā)酵提取物對脂質(zhì)氧化的抑制作用。結(jié)果表明，發(fā)酵提取物對DPPH自由基、羥基自由基有顯著的清除作用，隨著樣品濃度增加，清除作用增強。當樣品濃度為1.0mg/ml時，對DPPH自由基、羥基自由基的清除率最大，分別為82.9％和86％；提取物對超氧陰離子自由基的清除作用與

5、抑制脂質(zhì)氧化的作用不明顯，當樣品濃度為1.0mg/mL時的抑制率最大，分別為38％和19％。未發(fā)酵的脫脂麥胚提取物除了高濃度時對DPPH自由基有一定的清除作用，在其余抗氧化試驗中均未表現(xiàn)出抗氧化活性。 4．采用牛津杯法與濾紙片擴散法測定脫脂麥胚發(fā)酵提取物對八種主要致病菌的抑制作用，用二倍稀釋法確定發(fā)酵提取物的最小抑菌濃度(MIC)，并且研究了發(fā)酵提取物對高溫和紫外線的穩(wěn)定性以及不同作用時間對抑菌效果的影響。結(jié)果表明，脫脂麥胚發(fā)酵

6、提取物對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌都有明顯的抑制作用，最小抑菌濃度分別為12.5mg/mL，12.5mg/mL，50mg/mL；發(fā)酵提取物對供試的酵母菌和霉菌無抑制作用；經(jīng)過高溫處理和紫外處理的發(fā)酵提取物抑菌活性明顯下降，在12h內(nèi)隨著時間的延長抑制率上升；未經(jīng)發(fā)酵的脫脂麥胚提取物對八種供試菌都沒有抑制作用。 5．采用四氮唑藍(methylthiazolyltetrazolium，MTT)比色分析法，初步研究了脫脂麥

7、胚發(fā)酵提取物的體外抗腫瘤活性。通過脫脂麥胚發(fā)酵提取物對人類子宮頸癌細胞Hela細胞，鼠惡性黑素瘤B16細胞，人胃痛細胞SGC細胞，肺腺癌A549細胞四種腫瘤細胞的抑制增殖分析表明，脫脂麥胚發(fā)酵提取物對四種供試腫瘤細胞有不同程度的抑制增殖作用，最大抑制率為40.5％，最小抑制率為零。其中，甲醇提取物的抗腫瘤活性優(yōu)于乙醇提取物，隨著作用時間和濃度的增加，抑制率也增大；發(fā)酵提取物對B16細胞株的抑制作用最好。發(fā)酵液的兩種干燥方式對試驗?zāi)[瘤細胞