GM6001對高氧誘導的小鼠視網膜PEDF的影響的實驗研究.pdf

1、目的：本課題通過高氧誘導的小鼠視網膜新生血管動物模型玻璃體內注入GM6001觀察對視網膜PEDF表達的影響。 方法：選取鼠齡為7天的SPF級C57BL/6J小鼠48只(96只眼),隨機分為4組：正常組、高氧組、GM6001干預組和磷酸鹽緩沖液對照組,每組12只。正常對照組鼠在正?？諝猸h(huán)境中飼養(yǎng),其余3組鼠置于氧箱中,建立高氧誘導的視網膜新生血管動物模型。在出生后第12天GM6001干預組幼鼠向玻璃體腔內注射GM6001μl,而磷

2、酸鹽緩沖液對照組注射相同體積的磷酸鹽緩沖液,正常組和高氧組不做處理。各組小鼠均在出生后第17天處死。摘除左眼球制作石蠟標本,分別用抗PEDF和抗CD31抗體作免疫組織化學標記視網膜切片進行組織病理學觀察：右眼剝離視網膜提取蛋白,采用ELISA法分析PEDF以及MMPS在視網膜中的含量。 結果：高氧照組與正常組相比,視網膜組織可見大量突破內界膜的新生血管形成,炎癥細胞浸潤明顯,說明視網膜新生血管動物模型誘導成功。GM6001治療組

3、和PBS對照組相比,突破視網膜內界膜的新生血管稀疏,管腔細小,生長面積明顯縮??；免疫組織化學染色結果顯示,在正常視網膜組織,PEDF在視網膜各層均有較強表達,呈棕黃色或棕色顆粒以神經節(jié)細胞層和神經纖維層表達最為強烈,在外核層也有表達；高氧組和PBS對照組PEDF的在視網膜各層的表達均減弱,只是在神經節(jié)細胞層和神經纖維層有較明顯的表達；GM6001治療組視網膜各層均有較強表達,與正常組表達相近。ELISA結果顯示MMP-2,MMP-9,P

4、EDF的含量正常組、GM6001組、PBS對照組及高氧組之間在統(tǒng)計學上均有差異；GM6001組和正常組之間沒有統(tǒng)計學差異,高氧組和PBS對照組沒有統(tǒng)計學差異。在第17天時PEDF視網膜中的的含量GM6001組為PBS對照組的1.7倍,MMP-2視網膜中的含量GM6001組為PBS對照組的0.47倍,MMP-9視網膜中的的含量GM6001組為PBS對照組的0.36倍。 結論：玻璃體內注入一定劑量的GM6001通過抑制基質金屬蛋白酶