改良的可定量氧誘導(dǎo)法建立視網(wǎng)膜新生血管小鼠模型.pdf

1、溫州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文改良的可定量氧誘導(dǎo)法建立視網(wǎng)膜新生血管小鼠模型姓名：潘琪琦申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：眼科學(xué)指導(dǎo)教師：劉曉玲20080501溫州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文用A D P 酶組織化學(xué)法視網(wǎng)膜鋪片法定量三個氧氣誘導(dǎo)組P 1 7 小鼠平均視網(wǎng)膜中央無灌注區(qū)相對面積，用單因素方差分析多組間兩兩比較q 檢驗分析各組間差異。采用視網(wǎng)膜切片H E 染色和A D P 酶法視網(wǎng)膜鋪片觀察并對比正?？諝饨M和高氧誘導(dǎo)組P 1 2 、P 1 4 、P

2、1 7 和P 2 1 小鼠視網(wǎng)膜血管發(fā)育的特點。采用高分子熒光素灌注視網(wǎng)膜鋪片法高倍鏡下觀察正常空氣組和高氧誘導(dǎo)組P 1 7 小鼠淺層和深層視網(wǎng)膜血管發(fā)育的特點。結(jié)果1 、高氧誘導(dǎo)組視網(wǎng)膜血管發(fā)育特點：與正?？諝庵袑φ战M小鼠相比，高氧誘導(dǎo)后的小鼠生后第1 2 天至第1 7 天是視網(wǎng)膜新生血管增殖期，第1 7 天達到最大程度( 最高峰) ，第1 7 至第2 1 天是視網(wǎng)膜新生血管退行期。2 、成模和存活情況：根據(jù)本實驗參考制定的成模標(biāo)準(zhǔn)，

3、用傳統(tǒng)法和兩種改良法均建立小鼠視網(wǎng)膜新生血管動物模型成功，傳統(tǒng)組P 1 7 乳鼠成模率為8 2 ．3 5 ％，改良組I 和改良組I I 均為1 0 0 ％建模成功，兩種改良法乳鼠成模率均高于傳統(tǒng)法，但各組之間新生血管細胞增殖程度不同。小鼠( 母鼠和乳鼠) 存活情況：P 1 7 時，傳統(tǒng)組哺乳母鼠存活率為4 0 ％，改良組I 和改良組I I 均為1 0 0 ％。傳統(tǒng)組乳鼠存活率為4 7 ．0 6 ％，改良組I 和改良組1 1 分別為6 5

4、 ．5 2 ％和8 8 ．4 6 ％，與傳統(tǒng)法相比，兩種改良法具有母鼠死亡率低，乳鼠存活率高( P < O ．0 5 ) 的特點，且改良組I I 乳鼠存活率高于改良組I ( 尺0 ．0 5 ) 。3 、定量結(jié)果：空氣組視網(wǎng)膜平均每張H E 切片突破內(nèi)界膜增殖細胞數(shù)目為( 0 ．2 4 ±0 ．7 0 ) 個；傳統(tǒng)組視網(wǎng)膜平均每張H E 切片突破內(nèi)界膜增殖細胞數(shù)目為( 2 8 ．6 8 ±5 ．9 4 )個，改良

5、組I 和改良組1 1 分別為( 3 9 ．0 2 ±8 ．4 7 ) 個和( 3 1 ．0 0 ±6 ．4 4 ) 個。傳統(tǒng)組視網(wǎng)膜平均無灌注區(qū)相對面積為1 4 ．1 3 ％±3 ．1 2 ％，改良組I 和改良組I I 為2 6 ．7 8 ％±4 ．7 8 ％和1 2 ．1 5 ％±2 ．2 6 ％。三個氧氣誘導(dǎo)組與空氣組比較均建模成功( P < O ．0 5 ) 。采用改良組I

6、的建模方法小鼠視網(wǎng)膜平均每張切片突破內(nèi)界膜增殖細胞數(shù)和平均無灌注區(qū)相對面積均比傳統(tǒng)法和改良法I I 明顯增多，差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義( P < O ．0 5 ) ，但傳統(tǒng)法和改良法I I 之間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義( P = - O ．1 6 ) 。4 、各組特點：改良法I 的哺乳母鼠和乳鼠存活率均比傳統(tǒng)法提高，P 1 7 乳鼠出現(xiàn)大量新生血管細胞增殖、程度激烈。改良法I I 與另外兩法相比，母鼠和乳鼠存活率均較高；改良法I I 與改