米諾環(huán)素對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注后p-JNK、Bcl-2表達(dá)及神經(jīng)元凋亡的影響.pdf

1、目的： 研究米諾環(huán)素(Minocycline)對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷后不同時(shí)間點(diǎn)的病理形態(tài)學(xué)結(jié)果、對(duì)c—jun氨基末端激酶p—JNK、Bcl-2表達(dá)及細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)表達(dá)的影響。 方法： 1．建立大鼠右側(cè)大腦中動(dòng)脈阻斷(middlecerebralarteryocculusion，MCAO)局灶性腦缺血再灌注模型。2.72只健康雄性Wistar大鼠隨機(jī)分成假手術(shù)組、缺血再灌注組、MC(米諾環(huán)素)干預(yù)組，每組2

2、4只。每組又分別于缺血1h再灌注6h、12h、24h和48h用于指標(biāo)檢測(cè)。3．HE染色觀察腦組織形態(tài)病理學(xué)變化；免疫組化方法測(cè)定各組p—JNK，Bcl-2蛋白表達(dá)的變化；應(yīng)用TUNEL染色方法觀察各組神經(jīng)元凋亡情況。 結(jié)果： 1．HE染色發(fā)現(xiàn)米諾環(huán)素干預(yù)組在再灌注各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的梗塞灶與缺血組比較均減小，呈點(diǎn)狀分布并且神經(jīng)元損傷也明顯減輕。 2．免疫組化結(jié)果顯示：①缺血再灌注時(shí)缺血側(cè)皮層可見(jiàn)p—JNK陽(yáng)性表達(dá)，于缺血

3、再灌注后6h開(kāi)始出現(xiàn)并隨著時(shí)間的延長(zhǎng)p—JNK表達(dá)逐漸升高，持續(xù)增高至再灌注48h(P＜0．01)；MC干預(yù)組的p—JNK陽(yáng)性表達(dá)在各時(shí)間點(diǎn)均明顯減少(P＜0．01)。②與假手術(shù)組比較Bcl-2表達(dá)在缺血再灌注組明顯升高，并隨再灌注時(shí)間不同，其陽(yáng)性表達(dá)率亦不同，于缺血再灌注12h時(shí)陽(yáng)性表達(dá)達(dá)高峰(P＜0.01)，隨灌注時(shí)間延長(zhǎng)表達(dá)逐漸減少；MC干預(yù)組Bcl-2陽(yáng)性表達(dá)在各時(shí)間點(diǎn)明顯增加(P＜0.01)。 3．TUNEL染色顯示：

4、缺血再灌注組大鼠可見(jiàn)大量凋亡細(xì)胞，于再灌注6h開(kāi)始出現(xiàn)，隨再灌注時(shí)間的延長(zhǎng)其凋亡細(xì)胞數(shù)持續(xù)升高在48h時(shí)達(dá)到最高(P＜0.01)；MC(米諾環(huán)素)干預(yù)組凋亡細(xì)胞與缺血再灌注組相比均明顯減少(P＜0.01)。 結(jié)論： 1．線栓法成功地制備了大鼠局灶性腦缺血再灌注模型，術(shù)后大鼠神經(jīng)功能缺損明顯，TTC染色示腦梗死區(qū)，HE染色結(jié)果符合腦梗死病理過(guò)程。 2．p—JNK和Bcl-2參與大鼠腦缺血再灌注時(shí)缺血性細(xì)胞損傷(包括