Wip1在肺癌細胞中的表達及其作用機制初探.pdf

1、中山大學碩士學位論文Wip1在肺癌細胞中的表達及其作用機制初探姓名：趙吉星申請學位級別：碩士專業(yè)：外科學指導教師：顧勇20090604Wipl在肺癌細胞中的表達及其作用機制初探中文摘要研究目的檢測Wipl及Wiplp38MAPKp53信號通路相關蛋白在肺癌細胞中的表達情況，探討Wipl在肺癌發(fā)生中的作用機制，尋求肺癌靶向治療的新靶點。方法1人工培養(yǎng)二llzd細胞肺癌(nonsmallcelllungcancer，NSCLC)細胞(肺腺癌

2、細胞A549、肺鱗癌細胞NCI1299、大細胞肺癌細胞NCI一11460)和正常支氣管上皮細胞HBE。2抽提各種細胞總RNA進行實時熒光定量PCR反應，經PCR擴增目的片段及18srRNA對照片段，以Wipl和18srRNA擴增片段的圖像強度比值表示WiplmRNA的表達水平，分析WiplmRNA在肺癌細胞和正常支氣管上皮細胞的表達情況以及在不同肺癌細胞中表達的差異。3抽提細胞蛋白，以westernblot檢測Wipl蛋白的表達，以Wi

3、pl蛋白和GAPDH蛋白圖像的灰度比值表示Wipl蛋白的含量水平，并分析Wipl蛋白在肺癌細胞和正常支氣管上皮細胞的表達情況以及在不同肺癌細胞中表達的差異。4抽提細胞蛋白，以westernblot檢測p53、pp53、p38MAPK和pp38MAPK蛋白的表達水平，以其蛋白和GAPDH蛋白圖像的灰度比值表示其蛋白的含量水平，并分析Wiplp38MAPKp53通路的相關蛋白在肺癌細胞和正常支氣管上皮細胞的表達情況。結果lA549、NCI1

4、299、H460細胞中WiplmRNA的表達均高于HBE，差異有統(tǒng)計學意義(腳05)；各種肺癌細胞間WiplmRNA的表達無明顯差異(舢05)。2A549、NCI1299、H460細胞中Wipl蛋白的表達均高于HBE，差異有統(tǒng)計學意義(氏o05)；各種肺癌細胞間Wipl蛋白的表達無明顯差異(舢05)。3Pp53和pp38MAPK蛋白在肺癌細胞中的表達低于HBE，差異有統(tǒng)計學意義(PO05)，肺癌細胞中：Wiplt、pp38MAPKl、p