飲食限制誘導(dǎo)細(xì)胞自噬及其對(duì)老齡大鼠壽命的影響.pdf

1、第一部分血漿必需氨基酸濃度與細(xì)胞自噬程度相關(guān)性分析
　　 目的：探索血漿必需氨基酸的濃度對(duì)細(xì)胞自噬程度的影響。
　　 方法：老齡大鼠按體重隨機(jī)分為A組(正常飲食對(duì)照組)、B組(1天自由飲食1天禁食)、C組(5天自由飲食2天禁食)三組(每組15只)。飼養(yǎng)三個(gè)月后活體狀態(tài)下取1mm3肝臟組織4℃保存；心臟采血，經(jīng)抗凝、離心、去蛋白后取上清液-70℃保存。透射電鏡觀察各組肝臟細(xì)胞自噬泡的數(shù)量；高效液相色譜法(HPLC)檢測(cè)各組

2、血漿必需氨基酸含量；Spearman秩相關(guān)分析兩者之間的相關(guān)性。
　　 結(jié)果：纈氨酸濃度與細(xì)胞自噬程度的相關(guān)性最大(r=-0.779，P＜0.001)；賴氨酸的相關(guān)性最小(r=-0.517，P＜0.01)；苯丙氨酸、蛋氨酸和亮氨酸與細(xì)胞自噬程度的相關(guān)系數(shù)分別為-0.566、-0.527和-0.531(P＜0.01)；其余氨基酸的濃度與細(xì)胞自噬程度無相關(guān)性。
　　 結(jié)論：某些血漿必需氨基酸的濃度和細(xì)胞自噬的程度呈負(fù)相關(guān)，其

3、中纈氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、亮氨酸和賴氨酸的濃度對(duì)細(xì)胞自噬的程度影響較大。通過調(diào)節(jié)血漿氨基酸的水平來調(diào)控細(xì)胞自噬程度將是細(xì)胞自噬在臨床應(yīng)用中的一個(gè)方向。
　　 第二部分細(xì)胞自噬在飲食限制抗衰老效應(yīng)中的作用研究
　　 目的：觀察老齡大鼠在不同的飲食限制方式下肝臟細(xì)胞自噬水平和大鼠生存時(shí)間，分析二者之間的關(guān)系。
　　 方法：分組同前，飼養(yǎng)三個(gè)月后取標(biāo)本，高效液相色譜法(HPLC)檢測(cè)各組血漿必需氨基酸含量；透射電鏡觀

4、察各組肝臟細(xì)胞自噬泡的數(shù)量；RT-PCR檢測(cè)MAP1-LC3mRNA表達(dá)；術(shù)后繼續(xù)飼養(yǎng)大鼠，記錄生存時(shí)間，繪制生存曲線。
　　 結(jié)果：兩飲食限制組與對(duì)照組相比5種血漿必需氨基酸濃度明顯降低，肝臟細(xì)胞的自噬程度明顯增強(qiáng)，大鼠生存時(shí)間明顯延長(zhǎng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而兩飲食限制組間比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。關(guān)聯(lián)分析顯示大鼠生存時(shí)間和肝臟細(xì)胞自噬水平高度正相關(guān)(r=0.842，P＜0.01)。
　　 結(jié)論：通過降低血漿氨基酸濃度增強(qiáng)