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文檔簡(jiǎn)介
1、第一部分血漿必需氨基酸濃度與細(xì)胞自噬程度相關(guān)性分析
目的:探索血漿必需氨基酸的濃度對(duì)細(xì)胞自噬程度的影響。
方法:老齡大鼠按體重隨機(jī)分為A組(正常飲食對(duì)照組)、B組(1天自由飲食1天禁食)、C組(5天自由飲食2天禁食)三組(每組15只)。飼養(yǎng)三個(gè)月后活體狀態(tài)下取1mm3肝臟組織4℃保存;心臟采血,經(jīng)抗凝、離心、去蛋白后取上清液-70℃保存。透射電鏡觀察各組肝臟細(xì)胞自噬泡的數(shù)量;高效液相色譜法(HPLC)檢測(cè)各組
2、血漿必需氨基酸含量;Spearman秩相關(guān)分析兩者之間的相關(guān)性。
結(jié)果:纈氨酸濃度與細(xì)胞自噬程度的相關(guān)性最大(r=-0.779,P<0.001);賴氨酸的相關(guān)性最小(r=-0.517,P<0.01);苯丙氨酸、蛋氨酸和亮氨酸與細(xì)胞自噬程度的相關(guān)系數(shù)分別為-0.566、-0.527和-0.531(P<0.01);其余氨基酸的濃度與細(xì)胞自噬程度無(wú)相關(guān)性。
結(jié)論:某些血漿必需氨基酸的濃度和細(xì)胞自噬的程度呈負(fù)相關(guān),其
3、中纈氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、亮氨酸和賴氨酸的濃度對(duì)細(xì)胞自噬的程度影響較大。通過(guò)調(diào)節(jié)血漿氨基酸的水平來(lái)調(diào)控細(xì)胞自噬程度將是細(xì)胞自噬在臨床應(yīng)用中的一個(gè)方向。
第二部分細(xì)胞自噬在飲食限制抗衰老效應(yīng)中的作用研究
目的:觀察老齡大鼠在不同的飲食限制方式下肝臟細(xì)胞自噬水平和大鼠生存時(shí)間,分析二者之間的關(guān)系。
方法:分組同前,飼養(yǎng)三個(gè)月后取標(biāo)本,高效液相色譜法(HPLC)檢測(cè)各組血漿必需氨基酸含量;透射電鏡觀
4、察各組肝臟細(xì)胞自噬泡的數(shù)量;RT-PCR檢測(cè)MAP1-LC3mRNA表達(dá);術(shù)后繼續(xù)飼養(yǎng)大鼠,記錄生存時(shí)間,繪制生存曲線。
結(jié)果:兩飲食限制組與對(duì)照組相比5種血漿必需氨基酸濃度明顯降低,肝臟細(xì)胞的自噬程度明顯增強(qiáng),大鼠生存時(shí)間明顯延長(zhǎng),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而兩飲食限制組間比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。關(guān)聯(lián)分析顯示大鼠生存時(shí)間和肝臟細(xì)胞自噬水平高度正相關(guān)(r=0.842,P<0.01)。
結(jié)論:通過(guò)降低血漿氨基酸濃度增強(qiáng)
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