細(xì)胞自噬對腺花素誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞死亡的影響.pdf

1、細(xì)胞自噬（autophagy）指自身細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)包括衰老的細(xì)胞器、細(xì)胞質(zhì)成分以及長壽命蛋白通過雙層膜樣囊泡結(jié)構(gòu)包裹、運(yùn)送至溶酶體發(fā)生降解的過程。自噬廣泛存在于真核細(xì)胞的生命活動中，在適應(yīng)代謝應(yīng)激、保持基因組完整性及維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定方面發(fā)揮重要作用。一系列研究顯示，自噬參與細(xì)胞死亡的發(fā)生與發(fā)展過程，其對細(xì)胞死亡的影響可能為促進(jìn)、阻礙或無影響。最近，課題組在國際上首次報(bào)道，腺花素（Adenanthin），一種從腺花香茶菜葉子中提取的天然二萜類

2、化合物，通過抑制過氧化還原酶I/II（peroxiredoxin I/II）活性，引起細(xì)胞內(nèi)ROS累積從而選擇性的誘導(dǎo)肝細(xì)胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）細(xì)胞死亡。目前的研究發(fā)現(xiàn)，ROS的累積通常能增強(qiáng)細(xì)胞的自噬活性，故本研究主要關(guān)注自噬在腺花素誘導(dǎo)的HCC細(xì)胞死亡中的作用。通過Westernblot和免疫熒光技術(shù)發(fā)現(xiàn)，腺花素能夠顯著增強(qiáng)HCC細(xì)胞系Bel-7402細(xì)胞的自噬活性，表現(xiàn)為自噬重要標(biāo)志分子L

3、C3-II蛋白的明顯累積、GFP-LC3和內(nèi)源性LC3蛋白的聚集并呈現(xiàn)明顯的點(diǎn)狀分布于細(xì)胞漿內(nèi)。利用RNA干預(yù)技術(shù)沉默Beclin-1基因的表達(dá)并不影響腺花素誘導(dǎo)的細(xì)胞自噬活性增強(qiáng)效應(yīng)，同時也不影響腺花素引發(fā)的細(xì)胞死亡過程，提示腺花素誘導(dǎo)的HCC細(xì)胞自噬活性增強(qiáng)為非Beclin-1依賴的。進(jìn)一步地，CCK-8結(jié)果顯示，與野生型小鼠胚胎成纖維細(xì)胞（WT MEFs）相比，ATG5缺失（ATG5-/-）的MEF細(xì)胞對于腺花素誘導(dǎo)的細(xì)胞生長抑制