姬松茸液體深層發(fā)酵多糖的研究.pdf

1、該文探索了姬松茸胞內(nèi)多糖提取的最佳條件，并對所得胞內(nèi)多糖進(jìn)行分離純化及結(jié)構(gòu)和性質(zhì)的初探。同時(shí)對胞外多糖的脫蛋白工藝進(jìn)行研究，為綜合利用姬松茸液體發(fā)酵產(chǎn)物奠定基礎(chǔ)。 以液體深層培養(yǎng)的姬松茸菌絲體為原料，以多糖提取率為指標(biāo)，確定水提法提取姬松茸胞內(nèi)多糖的最優(yōu)條件。通過DEAE-纖維素柱和SephadexG-200對所得胞內(nèi)多糖進(jìn)行分離純化。采用凝膠色譜法測定多糖分子量，紙層析法分析單糖組成，光譜分析法初步鑒定多糖結(jié)構(gòu)。用不同乙醇(

2、95％)添加倍數(shù)進(jìn)行胞外多糖的提取，確定提取條件。通過對sevage法、三氯乙酸法和酶法的比較，找出姬松茸胞外多糖脫蛋白的最佳方法及最優(yōu)條件。 姬松茸液體發(fā)酵胞內(nèi)多糖的最佳提取條件為：提取溫度100℃、料液比1：30、提取時(shí)間3h、乙醇(95％)添加倍數(shù)3倍、提取次數(shù)2次，在此條件下，粗多糖的提取率達(dá)6.64％。胞內(nèi)多糖經(jīng)分離得到三種糖組分ABPI、ABPII-a和ABPII-b，其分子量分別為88500、85400和3700

3、0。三種多糖均為蛋白聚糖，其中ABPI和ABPII-a的糖鏈結(jié)構(gòu)主要由吡哺型葡萄糖通過α-糖苷鍵連接而成，ABPII-b的糖鏈結(jié)構(gòu)主要由吡喃型葡萄糖通過β-糖苷鍵連接而成。胞外多糖得率在乙醇添加倍數(shù)為3時(shí)最高。酶法對姬松茸胞外多糖脫蛋白的作用效果優(yōu)于sevage法和三氯乙酸法，中性蛋白酶的最適酶解條件為：溫度50℃、pH7、加酶量100u/g、時(shí)間1.5h。此條件下的蛋白質(zhì)含量為0.3028mg/mL胞外液，減少了41.97％；多糖得率