2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、背景:凋亡或程序性細(xì)胞死亡(programmed cell death,PCD)是一個(gè)細(xì)胞自毀的遺傳控制程序,該程序?qū)τ谒袆?dòng)物的發(fā)育、保持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)發(fā)揮至關(guān)重要的作用。凋亡是一個(gè)涉及大量基因的高度可調(diào)節(jié)程序,已發(fā)現(xiàn)多種因子參與調(diào)節(jié)凋亡過程,如TNF/Fas、Bcl-2家族等。程序化細(xì)胞死亡分子5(programmed cell death 5,PDCD5)是凋亡相關(guān)新基因,原名(TF-1 cell apoptosis-related

2、gene 19,TFAR19),PDCD5基因編碼的蛋白在從酵母到哺乳動(dòng)物中具有高度同源性。目前已有報(bào)道PDCD5與多種疾病相關(guān),如各種人類腫瘤、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)、銀屑病中該基因表達(dá)減弱,但其作用機(jī)制目前仍不清楚。本文通過檢測PDCD5和Fas在HBV感染攜帶者、HBV感染后慢性肝炎、肝硬化、肝癌、癌旁組織及肝細(xì)胞系中的表達(dá)情況,試圖揭示PDCD5與HBV感染相關(guān)肝臟疾病間的相互關(guān)系。 方法:本研究使用常規(guī)免疫組織化學(xué)方

3、法檢測了16例HBV攜帶者、46例慢性肝炎、23例活動(dòng)性肝硬化、18例急性肝炎及40例肝細(xì)胞癌患者PDCD5的表達(dá)情況及Fas、Bcl-2等凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá);用流式細(xì)胞術(shù)檢測HBV感染相關(guān)肝臟疾病患者PBMC中的PDCD5的表達(dá);用免疫細(xì)胞化學(xué)檢測各肝細(xì)胞系中PDCD5的表達(dá);利用流式細(xì)胞術(shù)觀察去血清聯(lián)合干擾素誘導(dǎo)凋亡后各肝細(xì)胞系PDCD5的表達(dá)動(dòng)態(tài)變化及不同細(xì)胞系之間的差異等。統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS13.0軟件,各組間比較用Krus

4、kal-Wallis H檢驗(yàn):相關(guān)性分析用Spearman’s檢驗(yàn)。 結(jié)果:肝組織免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示,HBV攜帶者、HBV感染后急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎、肝硬化和肝癌等各型HBV感染相關(guān)性肝臟疾病肝組織呈現(xiàn)不同的PDCD5表達(dá)譜,各型之間PDCD5表達(dá)量均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(χ2=93.155 P<0.0005)。PDCD5主要在細(xì)胞漿中表達(dá),各型肝臟疾病中PDCD5陽性肝細(xì)胞的分布和表達(dá)強(qiáng)度具有各自的特點(diǎn):慢性HBV攜帶者向慢性

5、肝炎的演變過程中、PDCD5表達(dá)逐漸增強(qiáng)(P<0.001),而從慢性肝炎向肝硬化發(fā)展的過程中,有些肝細(xì)胞PDCD5開始表達(dá)減弱或轉(zhuǎn)陰,而肝癌組織中的肝癌細(xì)胞主要表現(xiàn)為陰性(陽性率僅為10%)。在大部分病理情況下,淋巴細(xì)胞中PDCD5為陰性,而一些腫瘤組織中浸潤的淋巴細(xì)胞呈現(xiàn)PDCD5陽性。以上肝組織中的PDCD5蛋白表達(dá)均與Fas的表達(dá)具有相關(guān)性。利用流式細(xì)胞術(shù)檢測外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)中的PDCD5表達(dá)發(fā)現(xiàn),HBV感染患者的PD

6、CD5表達(dá)量高于正常人(P<0.001),有待進(jìn)一步闡明。 利用正常肝細(xì)胞系L-02細(xì)胞、肝癌細(xì)胞系HepG2細(xì)胞、在HepG2細(xì)胞中轉(zhuǎn)染了HBV DNA可以產(chǎn)生HBV病毒顆粒的HepG 2.2.15細(xì)胞、整合有70%HBV DNA并可以穩(wěn)定高分泌HBsAg的PLC/PRF/5細(xì)胞進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)。免疫細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果發(fā)現(xiàn)攜帶HBV基因的HepG2.2.15細(xì)胞和PLC/PRF/5細(xì)胞系在正常條件下部分細(xì)胞也表達(dá)PDCD5。與之相對(duì)

7、應(yīng),沒有病毒的L-02細(xì)胞和HepG2細(xì)胞則在正常培養(yǎng)條件下不表達(dá)PDCD5。利用流式細(xì)胞儀觀察去血清聯(lián)合干擾素誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡后正常肝細(xì)胞L-02、肝癌細(xì)胞HepG2、HepG 2.2.15、PLC/PRF/5細(xì)胞的PDCD5表達(dá)量動(dòng)態(tài)變化發(fā)現(xiàn),各肝細(xì)胞系PDCD5表達(dá)變化不同,其表達(dá)敏感度顯示為L-02

8、的影響時(shí)發(fā)現(xiàn),重組PDCD5對(duì)肝細(xì)胞僅有微弱的促凋亡作用,表明肝細(xì)胞系可能對(duì)外源性PDCD5不敏感。 結(jié)論:PDCD5在各種HBV感染后相關(guān)肝臟疾病中的表達(dá)譜有所不同,慢性乙型肝炎患者肝細(xì)胞中高表達(dá),并隨炎癥程度的加重而表達(dá)增強(qiáng);而在向癌癥演變的過程中表達(dá)減弱;HBV感染相關(guān)的肝臟疾病患者PBMC中PDCD5表達(dá)和正常入相比顯著增高,PDCD5蛋白的表達(dá)可能與HBV感染引起的各種肝臟疾病的發(fā)病機(jī)理相關(guān)。利用不同肝細(xì)胞系的體外實(shí)驗(yàn)

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