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1、 目的:通過(guò)研究深低溫保存前后大月齡胎兒主、肺動(dòng)脈帶瓣血管組織相容性白細(xì)胞抗原(HLA)的表達(dá)情況,了解HLA抗原的表達(dá)位置以及深低溫保存過(guò)程對(duì)HLA抗原表達(dá)的影響。 方法:取腦死亡胎兒(胎齡28周以上)主、肺動(dòng)脈帶瓣血管10例,熱缺血時(shí)間要求在12小時(shí)之內(nèi)。每例標(biāo)本分成兩部分,一部分新鮮者作為對(duì)照組;另一部分為實(shí)驗(yàn)組經(jīng)M199原液與二甲基亞砜(DMSO)處理后浸入液氮中深低溫凍存。所有標(biāo)本用冰凍切片包埋劑(ZLI-930
2、2)放在不銹鋼包埋模具上快速冷凍。它們被儲(chǔ)存在-20℃冰箱,然后用恒冷箱切片機(jī)(Leica CM 1900)切片。所有切片包在銀箔中儲(chǔ)存在-20℃冰箱中直到被染色,用免疫組化的方法利用鼠抗人單克隆抗體:HLA-ABC(0736)、HLA-DR(ZM-0136),CD45RO(ZM-0055),CD34(ZM-0046),檢測(cè)冷凍前后人組織相容性白細(xì)胞抗原Ⅰ類(HLAABC)、Ⅱ類(HLADR,DP,DQ)和內(nèi)皮細(xì)胞的變化情況,并將檢測(cè)結(jié)
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