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文檔簡介
1、目的:研究腫瘤壞死因子α(TNF α)和吡格列酮對3T3-L1脂肪細胞中葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4(GLUT4)mRNA和蛋白表達的影響。 方法:3T3-L1細胞進行細胞培養(yǎng)并誘導(dǎo)分化為成熟的3T3-L1脂肪細胞,將成熟的3T3-L1脂肪細胞隨機分為3組:對照組、TNFα干預(yù)組和吡格列酮干預(yù)組,其中TNF α干預(yù)組給予20ng/ml TNF α干預(yù);吡格列酮干預(yù)組給予10<'-4>mol/l吡格列酮干預(yù),干預(yù)時間分別為1d、3d、6d,然
2、后分別提取對照組、TNFα干預(yù)組和吡格列酮干預(yù)組細胞總RNA和總蛋白,進行逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)和蛋白質(zhì)印跡免疫分析(Western-blot),測定3T3-L1脂肪細胞中GLUT4 mRNA和蛋白表達量的變化,以未加任何藥物干預(yù)組即對照組做對照,整個實驗過程重復(fù)3次。 結(jié)果:實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn),與對照組比較TNF α干預(yù)組3T3-L1脂肪細胞中GLUT4 mRNA和蛋白的表達水平顯著低于對照組,差異有顯著性(P<0.01
3、),且與TNF α作用的時間呈遞減關(guān)系,而吡格列酮干預(yù)組與TNF α干預(yù)組結(jié)果相反,GLUT4 mRNA和蛋白的表達水平顯著高于對照組,差異有顯著性(P<0.05),且隨吡格列酮作用時間呈遞增關(guān)系。 結(jié)論:TNFα抑制3T3-L1脂肪細胞中GLUT4 mRNA和蛋白的表達而吡格列酮促進GLUT4 mRNA和蛋白表達,兩者的作用結(jié)果截然相反,并且與對照組相比差異都有顯著性。在3T3-L1脂肪細胞中,噻唑烷二酮類藥物吡格列酮通過增加
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