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文檔簡介
1、目的:觀察腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、非諾貝特(FF)和吡格列酮(PIO)對3T3-L1脂肪細(xì)胞TIMP-lmRNA表達(dá)的影響。 方法:以不同濃度的TNF-α、FF和PIO于不同時間段處理3T3-L1細(xì)胞,用RT-PCR技術(shù)檢測上述各個條件下3T3-L1脂肪細(xì)胞TIMP-1 mRNA的表達(dá)。 結(jié)果:(1)在3T3-L1前體脂肪細(xì)胞生長融合過程,TIMP-lmRNA表達(dá)量呈逐漸下降趨勢;在細(xì)胞分化過程中,TIMP-1
2、mRNA表達(dá)量逐漸下降直到4天,后逐漸上升;3T3-L1脂肪細(xì)胞成熟后,TIMP-1 mRNA表達(dá)水平呈逐漸上升趨勢,成熟后24小時的表達(dá)水平最高,后逐漸下降。(2)以0.1、1、10、50ng/ml的TNF-α處理3T3-L1成熟脂肪細(xì)胞24h,后三種濃度的TNF-α使TIMP-lmRNA增加。以50ng/mlTNF-α處理未分化的3T3-L1前體脂肪細(xì)胞和成熟脂肪細(xì)胞6h、12h、24h、48h、72h:處理分化過程中的3T3-L1
3、脂肪細(xì)胞2、4、6、8天,TIMP-1 mRNA表達(dá)量隨著TNF-α作用時間延長而逐漸增加。(3)經(jīng)0.1、1、10、100μmol/L PIO處理3T3-LI成熟脂肪細(xì)胞24h后,后三種濃度的PIO使TIMP-1 mRNA減少。予100 μmol/LPIO作用3T3-L1前體脂肪細(xì)胞和成熟脂肪細(xì)胞6h、12h、24h、48h、72h,用1001.μmol/L PIO處理分化過程中的3T3-L1脂肪細(xì)胞2、4、6、8天,TIMP-lmR
4、NA表達(dá)量隨著PIO作用時間延長而逐漸減少。(4)3T3-L1成熟脂肪細(xì)胞經(jīng)0.1、1、10、100μ mol/L FF處理24h后,后兩種濃度的PIO使TIMP-1 mRNA減少。予100 μmol/L FF作用3T3-L1前體脂肪細(xì)胞和成熟脂肪細(xì)胞6、12、24、48、72h,處理分化過程中的3T3-Ll脂肪細(xì)胞2、4、6、8天,TIMP-1 mRNA表達(dá)量隨著FF作用時間延長而逐漸減少。(5)予100μmol/L PIO和50ng
5、/ml TNF-α作用未分化、分化過程中、成熟的3T3-L1細(xì)胞,與100μmol/L PIO組相比,各時段TIMP-1mRNA均表達(dá)上升;與50ng/ml TNF-α組相比,各時段TIMP-l mRNA均表達(dá)下降。(6)予100μmol/L FF和100μmol/L PIO作用于未分化、分化過程中、成熟的3T3-L1細(xì)胞,與100μ mol/L PIO組相比,各時段TIMP-l mRNA均表達(dá)下降;與100μ mol/L FF組相比,
6、各時段TIMP-l mRNA表達(dá)均明顯下降。 結(jié)論:(1)TIMP-1在未分化、分化過程中、成熟3T3-L1細(xì)胞均有表達(dá).(2)TNF-α以時間劑量依賴方式誘導(dǎo)成熟3T3-L1細(xì)胞TIMP-l mRNA表達(dá),以時間依賴方式誘導(dǎo)未分化的、分化過程中3T3-LI細(xì)胞TIMP-l mRNA表達(dá).(3)PIO以時間劑量依賴方式抑制成熟3T3-L1細(xì)胞TIMP- lmRNA表達(dá),以時間依賴方式減少未分化的、分化過程中3T3-L1細(xì)胞TI
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