腫瘤壞死因子α、吡格列酮對(duì)3T3-L1脂肪細(xì)胞脂聯(lián)素表達(dá)的影響.pdf_第1頁
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1、目的:觀察吡格列酮(P10)和腫瘤壞死因子α(TNF-Q)對(duì)3T3-L1細(xì)胞脂聯(lián)素mRNA表達(dá)和脂聯(lián)素分泌的影響。 方法:以不同濃度PIO和TNF-α于不同時(shí)間段處理3T3-L1細(xì)胞,采用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)上述各個(gè)條件下脂聯(lián)素mRNA的表達(dá)水平;用ELISA的方法檢測(cè)培養(yǎng)液中脂聯(lián)素濃度。 結(jié)果:(1)脂聯(lián)素mRNA和蛋白在3T3-L1前體脂肪細(xì)胞中不表達(dá):在脂肪細(xì)胞分化過程中的表達(dá)呈逐漸上升趨勢(shì)。(2)以0.1ng/m

2、l、1ng/ml、10ng/ml、100ng/ml的TNF-Q刺激成熟脂肪細(xì)胞48h后,末三種濃度的TNF-α使脂聯(lián)素mRNA表達(dá)量分別減少12.64%、29.31%、68.65%,呈劑量依賴性。以100ng/mlTNF—α處理分化過程中的3T3一L1脂肪細(xì)胞,第2天無脂聯(lián)素mRNA的表達(dá),與對(duì)照組相比,第4、6、8天表達(dá)量分別減少3.40%、10.54%、17.60%,呈時(shí)間依賴性。予100ng/mlTNF-α干預(yù)成熟脂肪細(xì)胞,脂聯(lián)素

3、mRNA在第24、48、72h分別減少12.38%、63.44%、64.33%,呈時(shí)間依賴性。在成熟脂肪細(xì)胞,TNF—Q對(duì)脂聯(lián)素蛋白分泌呈劑量依賴性抑制。(3)以O(shè).1umol/L、1umol/L、10um01/L、100um01/L的PlO分別干預(yù)成熟脂肪細(xì)胞48h后,末兩種濃度的PIO分別使脂聯(lián)素mRNA相應(yīng)上升了4.40%、18.58%,呈劑量依賴性。予100umol/LP10作用3T3-L1前體脂肪細(xì)胞,第2、4、6天均無脂聯(lián)素

4、mRNA表達(dá),在第8天開始出現(xiàn)。用100umol/LPIO處理分化過程中的3T3-L1脂肪細(xì)胞,第2天無脂聯(lián)素mRNA表達(dá),在第4、6、8天的表達(dá)量分別增加¨.5l%、26.75%、41.05%,呈時(shí)間依賴性。以100umol/LPIO刺激成熟脂肪細(xì)胞,脂聯(lián)素mRNA表達(dá)量在第12、24、48、72h分別增加17.8%、27.98%、55.73%、58.66%,呈時(shí)間依賴性。在分化和成熟脂肪細(xì)胞中,PIO分別以時(shí)間依賴和時(shí)間劑量依賴性促

5、進(jìn)脂聯(lián)素的分泌。(4)100umol/LPIO和1.00ng/mlTNF-a共同作用成熟脂肪細(xì)胞48h后,與單用100ng/mlTNF—α刺激成熟脂肪細(xì)胞48h比較,脂聯(lián)素mRNA表達(dá)量增加15.8%。 結(jié)論:脂聯(lián)素基因及蛋白的表達(dá)隨3T3-L1細(xì)胞分化時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸增加。TNF-α以時(shí)間劑量依賴性抑制成熟脂肪細(xì)胞脂聯(lián)素mRNA表達(dá),以時(shí)間依賴性抑制分化過程中的3T3一U細(xì)胞脂聯(lián)素mRNA表達(dá);對(duì)脂聯(lián)素蛋白分泌呈劑量依賴性抑制

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