雌激素受體α基因Pvull和Xbal酶切多態(tài)性與冠心病相關性研究.pdf

1、通過檢測雌激素受體α基因PvuⅡ和xbaⅠ酶切多態(tài)性在冠心病和正常人群中的分布特點和差異，分析雌激素受體基因多態(tài)性與冠心病易感性的關系，探討冠心病發(fā)病的遺傳學因素，并為疾病的早期預防和干預提供理論依據。 對象和方法： 1．研究對象 冠心病患者236例，男性169例，女性67例，年齡64±11(40-88)歲，病例選自2004年4月至2006年12月在中山大學附屬五院心內科住院患者，其中經心電圖動態(tài)改變及血清心肌壞死

2、標志物的升高診斷為急性心肌梗死患者106例，130例患者經臨床表現(xiàn)及冠狀動脈造影確診；117例對照選自健康體檢者或同期到我院住院的非CAD患者，男性75例，女性42例，年齡62±11(42-84)歲，并排除嚴重肝、。腎疾病的隨機個體。研究對象間無血緣關系，均為中國南方漢族成人。 2．冠狀動脈病變程度評價通過冠狀動脈造影，兩位術者分別對右冠狀動脈、左冠狀動脈前降支、左旋支和左主干阻塞病變程度進行評價。各主要分支存在50﹪以上狹窄定

3、義為有意義病變，并根據累及支數(shù)定義為單支、雙支或多支病變，累及左主干者計作2支病變。根據美國心臟協(xié)會所規(guī)定的冠狀動脈血管圖像記錄分段評價標準和采用Genisini積分系統(tǒng)，對每支血管病變程度進行定量評定，每例患者冠狀動脈病變程度的最終積分為各分支積分之和。 3．臨床資料的收集設計冠狀動脈粥樣硬化登記調查表，詳細記錄每一病例的臨床表現(xiàn)、體格檢查、輔助檢查、生化指標、家族史及傳統(tǒng)的冠心病危險因素。 4．基因多態(tài)性檢驗采集外周

4、靜脈血，用標準方案提取基因組DNA，應用聚合酶鏈反應一限制片斷長度多態(tài)性(PCR-RFLP)分析的方法，獲得冠心病組和對照組的ER基因Pvu Ⅱ、XbaⅠ多態(tài)性結果； 5．統(tǒng)計學分析所有計量資料均通過X±S表示，均數(shù)之間比較用方差分析或t檢驗，各組頻數(shù)間差異比較用x<'2>檢驗。檢驗的顯著性水平設定為0.05?；蛐拖鄬ξｋU度以比數(shù)比(oddsratio，0R)表示。所有數(shù)據利用Excel數(shù)據庫和SPSS11.0軟件完成。

5、 研究結果： 1．Hardy-Weinberg平衡檢驗ER α基因Pvu Ⅱ和XbaⅠ基因型頻率觀察數(shù)與期望數(shù)無顯著性差異(在CAD組人群PvuⅡ、XbaⅠ基因型x<'2>分別為1.817和0.519，P均>0.05，對照組人群Pvu Ⅱ、XbaⅠ基因型x<'2>分別為0.934和0.383，P均>0.05)，研究對象符合Hardy-weinberg遺傳平衡，表明本研究資料具有群體代表性。 2．Erα基因Pvu Ⅱ多態(tài)性分布特

6、點及比較在中國南方漢族人CAD患者中Erα基因Pvu Ⅱ多態(tài)性中存在PP、Pp、pp三種基因型，其基因型頻率分別為19.9﹪、44.5﹪和35.6﹪，P、p等位基因頻率分別為42.2﹪和57.8﹪；與對照組相比，其基因型分布具有顯著性差異(19.9﹪，44.5﹪3n 35.6﹪vs 9.4﹪，48.7﹪和41.9﹪，x<'2>=6.387，P<0.05)，表現(xiàn)為CAD組PP純合子頻率顯著高于對照組(19.9﹪vs9.4﹪．X<'2>=6

7、.297，P<0.05)，CAD組P等位基因型頻率也顯著高于對照組(42.2﹪VS 33.8﹪，X<'2>=4.625．P<0.05)，PP純合子與P等位基因攜帶者(Pp+PP)的OR(95﹪CI)為2.396(1.192-4.817)，而P與P等位基因的OR(95﹪CI)為1.430(1.032-1.983)。急性心肌梗死亞組PvuⅡ的頻率分布與對照組相比也有顯著性差異(17.0﹪，55.7﹪和 27.4﹪vs9.4﹪，48.7﹪和

8、41.9﹪，X<'2>=6.325，P<0.05)，表現(xiàn)為pp純合子和P等位基因顯著低于對照組(27.4﹪和 55.2﹪vs41.9﹪和66.2﹪，x<'2><,1>=5.157，x<'2><,2>=5.709，p<0.05)，PP純合子與P等位基因攜帶者(PP+Pp型基因)比較，其OR(95﹪CI)為0.523(0.298～0.918)，p與P等位基因的OR(95﹪CI)為0.628(0.428～0.921)。 3．冠心病患者

9、及對照人群的Erα基因XbaⅠ多態(tài)性分布特點及比較研究對象中Erα基因XbaⅠ多態(tài)性存在XX、Xx、xx三種基因型，分別占4.2﹪，24.6﹪和71.2﹪，X、x等位基因頻率分別為16.5﹪和83.5﹪；對照組中三種基因型分別占3.4﹪，25.6﹪和70.9﹪，X、X等位基因頻率分別為16.2﹪和 83.8﹪。兩組基因型和等位基因頻率均無統(tǒng)計學差異(X<'2><,1>=0.168，X<'2><,2>=0.009，P>0.05)。心肌梗死

10、亞組XbaI基因型的頻率分布與對照組相比亦無顯著性差異(X<'2>=2.624，P>0.05)：兩組間X與x等位基因頻率無顯著性差異(x<'2>=2.737，P>0.05)。 4．冠狀動脈病變程度與Erα基因多態(tài)性分布比較4.1 CAD患者冠狀動脈病變分為單支、雙支和多支病變。Pvu Ⅱ三種基因型及等位基因比較均無顯著性差異(x<'2><,1>=3.304，x<'2><,2>=0.268，P均>0.05)，xbaⅠ三種基因型及等

11、位基因比較也均無顯著性差異(x<'2><,1>=5.938，x<'2><,2>=4.919，P均>0.05)。 4.2 CAD患者冠狀動脈病變程度積分在Pvu Ⅱ多態(tài)性的三種基因型之間差異有統(tǒng)計學意義(F=4.633，P<0.05)，進一步兩兩比較，PP純合子冠狀動脈病變程度積分顯著高于Pp基因型(15.50±10.58vs10.75±8.03)及pp純合子(15.50±10.58 vs 10.57±7.03)(t<,1>=2.584，

12、t<,2>=2.431，P<0.05)，而Pp、pp基因型之間差異無統(tǒng)計學意義(t=0.137，P>0.05)。XbaⅠ基因多態(tài)性之間病變程度積分差異均無統(tǒng)計學意義(F=0.738，P>0.05)。 5．Erα基因多態(tài)性與冠心病危險因素的關系5.1 CAD組Pvu Ⅱ基因多態(tài)性與CAD危險因素比較，可見基因型分布與總膽固醇(TC)、甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白(LDL)及高血壓病、糖尿病、高脂血癥、吸煙間差異均無統(tǒng)計學意義(P

13、>0.05)，而與高密度脂蛋白(HDL-C)之間差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，現(xiàn)為pp純合子的HDL-C水平顯著高于P等位基因攜帶者(PP+Pp)(t<,1>=2.697，t<,2>=2.735，P<0.05)，而Pp、pp基因型之間差異無統(tǒng)計學意義(t=0.137，P>0.05)； 5.2 CAD組XbaⅠ基因多態(tài)性與CAD危險因子比較，可見基因型分布與總膽固醇(TC)、甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋

14、白(HDL)及高血壓病、糖尿病、高脂血癥、吸煙間差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)； 6．Erα基因多態(tài)性在研究對象不同年齡段人群中的分布情況以55歲為標準，將研究對象分成“<55歲”和“≥55”歲組，CAD組和對照組中PvuⅡ和XbaⅠ三個基因型在組內和組間年齡間差異均無無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；等位基因P與p、X與x也無統(tǒng)計學差異(P>0.05)7．Erα基因多態(tài)性在不同性別研究對象中的分布情況CAD組和對照組中Pvu

15、Ⅱ和XbaⅠ三個基因型在組內和組間男女間無統(tǒng)計學差異(P>0.05)，等位基因P與p及X與X也無統(tǒng)計學差異(P>0.05)； 8．CAD組及對照組中基因多態(tài)性及CAD相關危險因素與CAD發(fā)生的綜合分析對CAD發(fā)生的相關因素(包括年齡、性別、高血壓、糖尿病、高脂血癥、吸煙)及ER α Pvu Ⅱ和XbaⅠ的三種基因型，以及將Pvu Ⅱ基因型分成PP與非PP兩類進行Logistic逐步回歸分析(baCkwalk：LR法)，結果依次顯

16、示吸煙、糖尿病、高血壓、高脂血癥及PvuⅡ的PP型與CAD的發(fā)生相關，說明PP基因型是CAD的獨立危險因素。 結論： 1．在中國南方漢族人群中存在著Erα Pvu Ⅱ和XbaⅠ基因多態(tài)性； 2．在中國南方漢族人群中ER α Pvu Ⅱ基因多態(tài)性與CAD和AMI相關，PP基因型的個體對CAD更易感，P等位基因可能是CAD獨立遺傳危險因子；PP純合子的CAD患者Genisini積分較高，提示Pvu Ⅱ基因多態(tài)性與冠心