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文檔簡(jiǎn)介
1、中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文雌激素受體α(ERα)基因多態(tài)性與子宮肌瘤的相關(guān)性研究初探姓名:陳桂勇申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):細(xì)胞生物學(xué)指導(dǎo)教師:王介東20040601中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)碗士學(xué)位論文多態(tài)性與子宮肌瘤發(fā)病之間的相關(guān)性進(jìn)行了初探性研究。在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)過程中,我們所采用的技術(shù)路線是,先以這9個(gè)外顯子編碼區(qū)上、下游各200bp的序列為引物設(shè)計(jì)范圍,設(shè)計(jì)出9對(duì)引物分別進(jìn)行目的片段的PCR擴(kuò)增:經(jīng)電泳檢測(cè)見陽性條帶后進(jìn)行dHPLC檢測(cè);然后按
2、照dllPLC檢測(cè)結(jié)果所分出的變異組和非變異組,按比例分別從兩組中隨機(jī)選取若~1二個(gè)樣品,重新擴(kuò)增并經(jīng)電泳檢測(cè)為陽性后將剩余的PCR產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序:再將測(cè)序結(jié)果與NCgI數(shù)據(jù)庫中的相應(yīng)序列做多重比對(duì),在驗(yàn)證已知SNP位點(diǎn)的同時(shí),我們也發(fā)現(xiàn)了一些新的可能變異位點(diǎn),但這還有待于進(jìn)一步進(jìn)行驗(yàn)證。根據(jù)dHPLC檢測(cè)所分出的變異組和非變異組,針對(duì)子宮肌瘤組和正常對(duì)照組之間,ER一口基因中這9個(gè)外顯子的序列多態(tài)性位點(diǎn)的分布差異,采用卡方檢驗(yàn)分別進(jìn)行統(tǒng)
3、計(jì)學(xué)分析,結(jié)果發(fā)現(xiàn)子宮肌瘤組與正常對(duì)照組之間,在EXONl、Ex0N2和Ex0N4的序列多態(tài)性變異上存在著統(tǒng)討’學(xué)差異。其中,子宮肌瘤組在EXONI和Ex0N4序列多態(tài)性變異的發(fā)生率上明顯低于正常對(duì)照組,而EXON2序列多態(tài)性變異的發(fā)生率則明顯高于正常對(duì)照組。其中EXONl和EXON2的P值均小于O01,EXON2編碼ER。G受體蛋白結(jié)構(gòu)的AfB區(qū),即轉(zhuǎn)錄激活區(qū)AF1所在的區(qū)域,這可能與ERa受體參與子宮肌瘤發(fā)生過程中的基因表達(dá)調(diào)控有關(guān)
4、。,在NCBI數(shù)據(jù)庫中,EXON2編碼區(qū)內(nèi)已知的SNP位點(diǎn)有兩個(gè),分別為T/C(Codonl0)rs2077647和G/C(Codon87)—rs746—432。在本研究的子寓肌瘤組和正常對(duì)照組中,通過測(cè)序只檢測(cè)出T/C(Codonl0)!s2072魚鰓,而未能檢測(cè)出G/C(Codon87)£12壘鱧32這個(gè)SNP位點(diǎn)。分析其原因,‘一方面可能是由于本實(shí)驗(yàn)中所用樣本例數(shù)太少,不足于檢測(cè)出出現(xiàn)頻率較低的SNP位點(diǎn):另一方面也可能是該位點(diǎn)在
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