ApoB、ApoC-Ⅰ和LDLR基因多態(tài)性與冠心病相關(guān)性研究.pdf

1、目的：建立LDLR基因rs688、ApoB基因rs693和ApoC-Ⅰ基因rs4420638單核苷酸多態(tài)性（SNP）位點(diǎn)的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-高分辨率熔解曲線（PCR-HRM）的檢測(cè)方法，并探討上述位點(diǎn)與冠心?。–HD）易感和血脂水平的相關(guān)性。
　　方法：針對(duì)rs688、rs693和rs4420638位點(diǎn)分別設(shè)計(jì)引物，建立PCR-HRM分子診斷方法，并通過直接測(cè)序進(jìn)行驗(yàn)證；運(yùn)用上述建立的PCR-HRM檢測(cè)方法對(duì)rs688、rs693和

2、rs4420638位點(diǎn)進(jìn)行基因分型；通過病例-對(duì)照研究（其中CHD組311例、健康對(duì)照組300例）探討上述位點(diǎn)與CHD的易感性；以462例蘭州地區(qū)漢族人群為研究對(duì)象，分析上述位點(diǎn)與血脂水平的關(guān)系。
　　結(jié)果：⑴PCR-HRM檢測(cè)方法的建立：本研究基于HRM技術(shù)建立了rs693、rs688和rs4420638位點(diǎn)的PCR-HRM檢測(cè)方法，并成功地檢測(cè)了1073例臨床標(biāo)本（CHD組311例、健康對(duì)照組300例、血脂研究組462例），從

3、而實(shí)現(xiàn)了其基因多態(tài)性的快速檢測(cè)。⑵CHD易感性分析：健康對(duì)照組 rs688、rs693和rs4420638位點(diǎn)均達(dá)到Hardy-Weinberg平衡（?2值分別為3.055、2.804、1.151。P>0.05）；rs693和rs4420638位點(diǎn)的基因頻率和基因型頻率在CHD組與對(duì)照組之間的分布差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（rs693：2=8.167，P=0.004；2=8.836，P=0.003；rs4420638：2=8.664，P=0.0

4、03；2=9.512，P=0.002）；在加性模型下，并調(diào)整性別、年齡、BMI后，對(duì)rs693、rs4420638和rs688位點(diǎn)進(jìn)行多元Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)，rs693和rs4420638位點(diǎn)基因多態(tài)性與蘭州地區(qū)漢族人CHD易感性相關(guān)。與rs693 CC基因型相比，rs693CT基因型個(gè)體患CHD的風(fēng)險(xiǎn)下降（OR=0.448，95％CI：0.246~0.817，P=0.009）；與rs4420638 AA基因型相比，rs442

5、0638 AG基因型的個(gè)體患CHD的風(fēng)險(xiǎn)增加（OR=2.140，95%CI：1.241~3.688，P=0.006）；rs688（C>T）和rs4420638（A>G）位點(diǎn)組成的單倍型CG增加CHD的患病風(fēng)險(xiǎn)（OR=1.715，95% CI：1.091~2.697，P=0.018）。⑶血脂水平關(guān)聯(lián)性分析：經(jīng)單因素方差分析發(fā)現(xiàn)，rs688位點(diǎn)各基因型之間的TC、LDL-C水平差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；rs693位點(diǎn)各基因型之間的

6、TC、TG水平差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；rs4420638位點(diǎn)各基因型之間的TG水平差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；在顯性模型下，分別以TC、TG、LDL-C、HDL-C為因變量，以性別、年齡、BMI、rs688、rs693、rs4420638為自變量進(jìn)行多元線性回歸分析發(fā)現(xiàn)，rs688 T等位基因攜帶者的TC、LDL-C水平高于CC純合型（β=0.301，P<0.001；β=0.335，P<0.001）；rs693T等位

7、基因攜帶者的TC、TG水平低于CC純合型（β=-0.250，P=0.027；β=-0.162，P=0.029）；rs4420638G等位基因攜帶者的TG水平顯著高于AA純合型（β=0.180，P=0.016）。
　　結(jié)論：成功建立了rs693、rs688和rs4420638位點(diǎn)的PCR-HRM基因分型方法；rs693和rs4420638位點(diǎn)以及單倍型CG與蘭州地區(qū)漢族人群CHD易感性有關(guān)；rs693、rs688和rs4420638