銀杏達莫對梗阻性腎病大鼠腎間質(zhì)纖維化作用的實驗研究.pdf

1、目的：觀察轉(zhuǎn)化生長因子β<,1>(transforming growth factot-beta<,1>,TGF-β<,1>)在梗阻性腎病大鼠腎間質(zhì)纖維化過程中的表達，研究藥物銀杏達莫對腎間質(zhì)纖維化的防治作用及其作用機制。 方法：將45只健康6-8周齡的SD雄性大鼠隨機分為三組，每組15只：假手術(shù)組即對照組(打開大鼠腹腔只分離左側(cè)輸尿管但不結(jié)扎)；模型組(打開大鼠腹腔結(jié)扎左側(cè)輸尿管，建立梗阻性腎病動物模型)；藥物干預組(建立梗阻

2、性腎病動物模型后給予藥物銀杏達莫注射液12.5ml/kg腹腔注射)。于術(shù)后2W、3w、4W分別斷頸處死各組中的5只大鼠，處死前用代謝籠收集24小時尿量，做24小時尿蛋白定量檢測，并行心臟采血1ml用全自動生化分析儀檢測血尿素氮和肌酐水平；肉眼觀察腎臟的大體結(jié)構(gòu)改變，行蘇木素-伊紅(HE)染色和Masson染色光鏡觀察腎間質(zhì)的病理學改變，間質(zhì)纖維化半定量分析借助于Motic Med 6.0邁克奧迪數(shù)碼醫(yī)學圖象分析系統(tǒng)完成，電子顯微鏡觀察腎

3、間質(zhì)的超微結(jié)構(gòu)變化；用免疫組織化學半定量分析的方法測定TGF-β<,1>在各組中的表達情況。 結(jié)果：與假手術(shù)組相比，模型組大鼠左側(cè)腎臟明顯腫大，顏色蒼白，腎皮質(zhì)變薄，皮髓質(zhì)分界模糊，腎盂、腎盞極度擴張，其中充滿尿液，并隨著輸尿管梗阻時限的延長而加重，干預組上述變化輕微。HE染色顯示：輸尿管梗阻后2周腎間質(zhì)可見有較多炎癥細胞浸潤，彌漫性腎小管空泡變性，部分小管灶狀擴張、萎縮、壞死，輕度間質(zhì)纖維化，術(shù)后3周、4周上述變化逐漸加重；銀

4、杏達莫組上述改變有所減輕；假手術(shù)組術(shù)后2周也可見少量炎癥細胞浸潤，4周可見間質(zhì)纖維化改變。Masson染色顯示：假手術(shù)組可見炎細胞浸潤，間質(zhì)散在黃染；模型組見大量炎癥細胞，間質(zhì)區(qū)大面積黃染，并隨梗阻時間的延長而加重，銀杏達莫干預后黃染區(qū)面積明顯減小。電子顯微鏡可見腎小管基膜增厚，小管上皮細胞內(nèi)大量腫脹的線粒體，小管間質(zhì)大量炎癥細胞浸潤和纖維組織形成，模型組最顯著，干預組次之。免疫組織化學分析顯示，TGF-β1的升高與腎小管間質(zhì)纖維化的組

5、織學改變相平行，與腎間質(zhì)損害的評分之間無顯著相關(guān)性，(β=0.197，P=0.639)；TGF-β<,1>的表達水平腎小管間質(zhì)黃染面積成顯著正相關(guān)(β=0.935，P=0.000)。各組大鼠24小時尿蛋白定量，組間兩兩比較差異無顯著。與假手術(shù)組比較，模型組大鼠術(shù)后2周時血尿素氮和肌酐水平明顯升高，第3周時較第2周略降低，第4周時呈現(xiàn)繼續(xù)降低趨勢，但仍明顯高于假手術(shù)組。銀杏達莫干預組在手術(shù)后2周、3周、4周血尿素氮和肌酐水平均升高，但較模