柚皮素、高良姜揮發(fā)油對肺癌A549細胞生長影響的探討.pdf

1、[目的]
　　 柚皮素(Naringenin)是一種黃酮類化合物，具有多種生物學活性和藥理作用。本實驗探討了柚皮素和順鉑(DDP)對人肺癌細胞A549的增殖、凋亡及細胞周期的影響，為肺癌的治療提供一些實驗依據(jù)。
　　 高良姜(Alpinia officinarum Hance)是著名的十大南藥之一，在醫(yī)藥、食品和化妝品加工以及蔬果保鮮上有重要的作用。主要化學成分包括揮發(fā)油、二芳基庚烷類、淄醇類和黃酮類化合物，具有很強的藥

2、理作用。高良姜揮發(fā)油主要成分為1，8-桉葉素、2，2-二甲基環(huán)氧乙烷、葵烷、α-萜品醇、莰烯、樟腦、β-蒎烯、檸檬烯等。本實驗通過對高良姜揮發(fā)油對人肺癌細胞A549的增殖、凋亡及細胞周期影響的研究，探討其分子作用機制，旨在拓展新的植物化學藥物治療方法，為肺癌的多模式治療提供實驗資料。
　　 [方法]
　　 通過體外培養(yǎng)人肺癌A549細胞，利用MTT法分別檢測柚皮素、柚皮素和順鉑(DDP)聯(lián)合用藥、高良姜揮發(fā)油對A549細

3、胞增殖的影響，Hoechst33258/PI染色檢測A549細胞形態(tài)學變化以及流式細胞術(shù)(FCM)PI染色法檢測細胞周期的改變。Western blot檢測高良姜揮發(fā)油處理A549細胞24h后PARP，Bid，Caspase-3及Caspase-8蛋白的表達。用pcDNA，pcDNA-Bcl-2，pcDNA-Bcl-xl質(zhì)粒轉(zhuǎn)染A549細胞后，高良姜揮發(fā)油處理A549細胞24h，Western blot檢測Bcl-2，Bcl-xl，PA

4、RP，Bid，Caspase-3和Caspase-8蛋白的表達。
　　 [結(jié)果]
　　 (1)順鉑、柚皮素聯(lián)合用藥24h后，順鉑、柚皮素濃度為(16μM，12.5μM～100μM)時，與(16μM，0μM)組相比，抑制人肺癌A549細胞增殖。同樣當順鉑、柚皮素濃度為(32μM，12.5μM～100μM)時，與(32μM，0μM)相比，抑制人肺癌A549細胞增殖。
　　 (2)流式細胞儀分析顯示：不同濃度的柚皮素處

5、理A549細胞24h后，與對照組相比，G1期細胞減少，S期及G2期細胞增多，說明柚皮素能影響A549細胞周期，使細胞停滯于S期及G2期，有利于細胞DNA的合成但阻止細胞分裂。
　　 (3)不同濃度高良姜揮發(fā)油分別處理24h后，人肺癌細胞A549的生長增值受到明顯的抑制，并呈現(xiàn)濃度依賴關(guān)系。
　　 (4)不同濃度高良姜揮發(fā)油處理A549細胞24h后，熒光染色顯示胞核固縮碎裂，呈大小不等的不規(guī)則塊狀、圓形或花瓣狀，出現(xiàn)典型的

6、細胞凋亡形態(tài)學變化。
　　 (5)流式細胞儀分析顯示：不同濃度高良姜揮發(fā)油處理A549細胞24h后，與對照組相比，G1期細胞增加，S期及G2期細胞減少，說明高良姜揮發(fā)油能影響A549細胞周期，使細胞停滯于G1期。
　　 (6)不同濃度高良姜揮發(fā)油處理A549細胞24h，Bid，Caspase-3，Caspase-8及PARP蛋白表達明顯高于對照組。
　　 [結(jié)論]
　　 柚皮素有增強順鉑對人肺癌A549細