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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:探討沉默GRP94基因?qū)Ψ伟〢549細(xì)胞增殖能力的影響及可能機(jī)制。
方法:分別采用qRT-PCR法、Western blot檢測(cè)不同肺癌細(xì)胞系和肺支氣管上皮細(xì)胞中GRP94的表達(dá);設(shè)計(jì)、合成靶向GRP94基因siRNA,通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染至人肺腺癌A549細(xì)胞中,采用qRT-PCR、Western blot分別檢測(cè)轉(zhuǎn)染siRNA-GRP94后細(xì)胞內(nèi)GRP94、c-myc及細(xì)胞周期蛋白cyclinD1 mRNA及蛋白水平表達(dá)的
2、影響;采用CCK-8實(shí)驗(yàn),平板集落實(shí)驗(yàn)檢測(cè)沉默GRP94對(duì)細(xì)胞的增殖能力的影響。
結(jié)果:qRT-PCR和Western blot結(jié)果顯示GRP94在肺癌細(xì)胞中的表達(dá)較肺支氣管上皮細(xì)胞顯著高表達(dá)( P<0.05, P<0.01), siRNA-GRP94組中GRP94、c-myc及cyclinD1表達(dá)明顯下調(diào)(P<0.05);A549細(xì)胞增殖能力受到明顯抑制(P<0.01, P<0.05)。
結(jié)論:GRP94在肺癌細(xì)胞
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