消渴通痹顆粒對(duì)糖尿病大鼠神經(jīng)缺血狀態(tài)下血管-神經(jīng)屏障的影響.pdf

1、目的:
　　1.研究益氣活血中藥消渴通痹顆粒對(duì)糖尿病大鼠神經(jīng)缺血狀態(tài)下“血管-神經(jīng)屏障”的影響。
　　2.探討該藥“益氣-攝脈”作用，探明該藥物對(duì)DPN大鼠神經(jīng)修復(fù)的作用機(jī)制，豐富中西醫(yī)理論，為臨床用藥提供理論依據(jù)。
　　方法:
　　1.分組:SD大鼠雌雄各半，共100只，隨機(jī)分為空白組，模型組，消渴通痹顆粒大、中、小劑量組，西洛他唑?qū)φ战M。
　　2.建立模型:查閱文獻(xiàn)，選取清潔級(jí)SD大鼠，結(jié)合本實(shí)驗(yàn)?zāi)康募?/p>

2、病癥特征，以公認(rèn)的復(fù)合造模法，復(fù)制成糖尿病大鼠神經(jīng)缺血模型。適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，除空白組外，其余組調(diào)配高脂飼料飼養(yǎng)4周。大鼠禁食12小時(shí)，予喂養(yǎng)普通飼料大鼠腹腔注射枸櫞酸緩沖液，予喂養(yǎng)高脂飼料大鼠左下腹腔單次注射1ml/kg劑量0.45％STZ溶液。納入實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)為72小時(shí)后，從大鼠尾靜脈取血，血糖儀測(cè)定血糖，測(cè)血糖≥16.7mmol/L者;剔除標(biāo)準(zhǔn)為血糖＜16.7mmol/L者。結(jié)扎符合血糖納入標(biāo)準(zhǔn)大鼠左側(cè)股動(dòng)靜脈，成功建立糖尿病周圍神經(jīng)病

3、變模型。
　　3.動(dòng)物治療藥物給藥劑量與方法:待復(fù)合模型成膜后3天開始干預(yù)?？瞻捉M、模型組予生理鹽水灌胃，消渴通痹顆粒各劑量組分別予相對(duì)濃度消渴通痹顆粒灌胃，西藥對(duì)照組予西洛他唑灌胃，持續(xù)6周。
　　4.觀察和檢測(cè):造模前后及治療后大鼠毛發(fā)、攝食、飲水、活動(dòng)度、傷口愈合情況及墊料干濕度等，每周檢測(cè)一次大鼠體重、血糖。治療后，檢測(cè)大鼠血清胰島素含量;一部分大鼠直接取左側(cè)坐骨神經(jīng)，觀察大鼠缺血部位神經(jīng)病理改變，檢測(cè)緊密連接蛋白o(hù)

4、ccludins的含量;另一部分大鼠右側(cè)股靜脈灌注EB后，取左側(cè)坐骨神經(jīng)，檢測(cè)EB含量。
　　結(jié)果:
　　1.大鼠體重變化在治療后階段，與模型組相比，大劑量組和小劑量組的體重下降程度減慢(P＜0.05)，中劑量組的體重下降程度明顯減慢(P＜0.01);2.血糖變化在治療后階段，與模型組相比，中劑量組血糖降低(P＜0.05);3.血清胰島素變化與模型組相比，中藥組大、小劑量組血清INS水平均降低(P＜0.05)，中劑量組INS

5、水平明顯降低，P＜0.01;4.HE染色使用光鏡觀察大鼠缺血部位神經(jīng)形態(tài)，模型組比空白組神經(jīng)中毛細(xì)血管數(shù)量明顯減少，各劑量治療組與模型組相比毛細(xì)血管數(shù)量增多，以中劑量為甚;5.occludins表達(dá)與模型組相比，中劑量組occludins表達(dá)顯著上調(diào)(P＜0.01)，大劑量組表達(dá)水平升高(P＜0.05);6.EB含量與模型組相比，中劑量組EB含量降低(P＜0.05)，西洛他唑組EB含量顯著降低(P＜0.01)。
　　結(jié)論:

6、　　消渴通痹顆?？梢杂行Ы档筒∽兇笫笱牵黾右葝u素敏感性，減少胰島素抵抗，延緩減重速度，改善糖尿病和周圍神經(jīng)缺血癥狀。消渴通痹顆粒在糖尿病大鼠缺血病變狀態(tài)下可通過刺激相關(guān)緊密連接蛋白o(hù)ccludin表達(dá)上調(diào)，降低病變神經(jīng)BNB通透性，從而延緩DPN大鼠的周圍神經(jīng)病變進(jìn)展，改善DPN大鼠周圍神經(jīng)病變狀態(tài)。從生物分子層面闡明消渴通痹顆粒對(duì)DPN大鼠神經(jīng)修復(fù)的作用機(jī)制之一。消渴通痹顆?？勺饔糜谔悄虿〈笫笕毖窠?jīng)側(cè)BNB系統(tǒng)神經(jīng)微血管緊密連接