正常及糖尿病大鼠血-視神經(jīng)屏障研究.pdf

1、隨著糖尿病發(fā)病率的增加和患者壽命的延長，糖尿病視神經(jīng)病變漸受重視。有關(guān)該病的發(fā)病機(jī)理目前尚不十分清楚且研究較少。近來，糖尿病與血-腦屏障的關(guān)系受到關(guān)注。由于視神經(jīng)在解剖和組織學(xué)上的特殊性，本研究把血-視神經(jīng)屏障特性的研究作為切入點(diǎn)，觀察血-視神經(jīng)屏障結(jié)構(gòu)和功能特征及其在糖尿病時(shí)的變化，探索其與糖尿病視神經(jīng)病變的關(guān)系，旨在豐富對血-視神經(jīng)屏障特性的認(rèn)識及糖尿病視神經(jīng)病變發(fā)病機(jī)理的研究，為其防治和進(jìn)一步研究提供理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)資料。該研究是我

2、國進(jìn)入老齡化社會(huì)后亟待研究的重要課題。本研究共分兩部分：首先對血-視神經(jīng)屏障特性進(jìn)行研究；在此基礎(chǔ)上，觀察糖尿病時(shí)血-視神經(jīng)屏障特性的變化。 第一部分正常大鼠血-視神經(jīng)屏障特性比較研究 本研究分別取20只正常雄性SD大鼠視神經(jīng)(篩板前區(qū)、篩板區(qū)、篩板后區(qū)、眶內(nèi)段、管內(nèi)段和顱內(nèi)段)、大腦皮層、坐骨神經(jīng)。采用電鏡觀察其微血管內(nèi)皮細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)；利用免疫組織化學(xué)和酶細(xì)胞化學(xué)的方法檢測血-腦屏障標(biāo)記物(GLUT-1、0X-

3、26、0X-47、EBA、ALP、γ-GGT)的表達(dá)和內(nèi)源性微血管通透性示蹤劑fibrinogen外滲，旨在探討血-視神經(jīng)屏障特性結(jié)構(gòu)和功能的特點(diǎn)。結(jié)果如下：視神經(jīng)各段、大腦皮層和坐骨神經(jīng)部位微血管內(nèi)皮細(xì)胞均為緊密連接，但篩板前區(qū)質(zhì)膜囊泡較大腦皮層多，較坐骨神經(jīng)少。免疫組織化學(xué)和酶細(xì)胞化學(xué)結(jié)果顯示：血-腦屏障標(biāo)記物GLUT-1和ALP在視神經(jīng)的各個(gè)分段、大腦皮層和坐骨神經(jīng)微血管內(nèi)皮細(xì)胞均陽性表達(dá)，陽性表達(dá)的微血管數(shù)+++；其它血-腦屏障

4、標(biāo)記物在篩板區(qū)、篩板后區(qū)、眶內(nèi)段、管內(nèi)段和顱內(nèi)段、大腦皮層陽性表達(dá)，陽性表達(dá)的微血管數(shù)+++，而在篩板前區(qū)和坐骨神經(jīng)微血管內(nèi)皮細(xì)胞無表達(dá)。與此相對照，內(nèi)源性微血管通透性示蹤劑fibrinogen在篩板區(qū)、篩板后區(qū)、眶內(nèi)段、管內(nèi)段和顱內(nèi)段、大腦皮層染色陰性，而在篩板前區(qū)和坐骨神經(jīng)微血管內(nèi)皮細(xì)胞染色陽性。以上結(jié)果表明：視神經(jīng)的篩板區(qū)、篩板后區(qū)、眶內(nèi)段、管內(nèi)段和顱內(nèi)段在結(jié)構(gòu)和功能上與血-腦屏障的特性相似，而篩板前區(qū)在結(jié)構(gòu)和功能上更接近血-坐骨

5、神經(jīng)屏障特性。 第二部分糖尿病大鼠血-視神經(jīng)屏障的變化 本研究采用20只腹腔內(nèi)注射鏈脲霉素誘導(dǎo)的4個(gè)月糖尿病大鼠，用透射電鏡觀察糖尿病大鼠視神經(jīng)不同分段微血管超微結(jié)構(gòu)變化(篩板前區(qū)、篩板區(qū)、篩板后區(qū)、眶內(nèi)段、管內(nèi)段和顱內(nèi)段)；利用免疫組織化學(xué)和酶細(xì)胞化學(xué)的方法檢測血-腦屏障標(biāo)記物(同第一部分)的表達(dá)和內(nèi)源性微血管通透性示蹤跡fibrinogen在糖尿病大鼠視神經(jīng)不同分段微血管的通透性，旨在探討糖尿病時(shí)血-視神經(jīng)屏障特性結(jié)

6、構(gòu)和功能的變化。結(jié)果顯示：糖尿病大鼠視神經(jīng)各個(gè)分段的微血管內(nèi)皮細(xì)胞緊密連接均有間斷破壞，質(zhì)膜囊泡較正常組顯著增多。免疫組織化學(xué)和酶細(xì)胞化學(xué)結(jié)果顯示：糖尿病時(shí)血-腦屏障標(biāo)記物GLUT-1和ALP在視神經(jīng)各個(gè)分段微血管的陽性表達(dá)數(shù)由正常的+++變?yōu)?；同樣，其它標(biāo)記物在篩板區(qū)、篩板后區(qū)、眶內(nèi)段、管內(nèi)段和顱內(nèi)段中的表達(dá)數(shù)也由正常的+++變?yōu)?。此外，內(nèi)源性微血管通透性示蹤劑fibrinogen在篩板區(qū)、篩板后區(qū)、眶內(nèi)段、管內(nèi)段和顱內(nèi)段微血管周