杜仲中降壓活性成分的分離和表征研究.pdf

1、論文在調(diào)研大量文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，以杜仲(Eucommia ulmoide Oliver)中降血壓藥用活性成分為目標(biāo)，對(duì)湖南產(chǎn)杜仲進(jìn)行了環(huán)烯醚萜類化合物的提取、純化、分離分析與結(jié)構(gòu)表征研究，從杜仲中提取分離了具有明顯生物活性的成分—京尼平苷酸和京尼平苷。系統(tǒng)地研究了杜仲中京尼平苷酸和京尼平苷的提取、純化、分離的工藝條件，所得到的單體通過(guò)HPLC、UV、IR、HNMR、MS等儀器手段進(jìn)行定性、定量分析，確定了其結(jié)構(gòu)。為開發(fā)利用杜仲提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)

2、與基礎(chǔ)。具體內(nèi)容摘要如下： 1．京尼平苷酸和京尼平苷的提取。系統(tǒng)地研究了乙醇溶劑提取法、酶提取法、半仿生提取法和CO<,2>超臨界提取法從杜仲中提取環(huán)烯醚萜類化合物京尼平苷酸和京尼平苷，對(duì)這四種方法的提取效果進(jìn)行了比較，得到了最優(yōu)提取工藝一半仿生法提取，取10g樣品，加入100mL的蒸餾水，調(diào)節(jié)pH=1.5，在60℃下提取1.5h，過(guò)濾后再依次用pH=7.5和pH=8.5的水在相同條件下提取二次，京尼平苷酸和京尼平苷的得率分別

3、達(dá)1.50％和0.49％。 2．京尼平苷酸和京尼平苷的純化。首先選擇了溶劑萃取方法進(jìn)行一次純化，再系統(tǒng)地比較了硅藻土吸附、活性炭吸附、聚酰胺柱色譜和A型大孔吸附樹脂純化杜仲中京尼平苷和京尼平苷酸，選擇A型大孔吸附樹脂法純化杜仲中京尼平苷和京尼平苷酸，優(yōu)化了純化工藝，總收率分別達(dá)到84.15％和73.49％。 3．杜仲中活性單體的分離。采用硅膠柱色譜法分離環(huán)烯醚萜類化合物純化后產(chǎn)品，得到高純度的京尼平苷和京尼平苷酸單體。采

4、用硅膠將樣品低溫吸附，揮發(fā)去除溶劑，烘干后上柱，用不同配比的氯仿和甲醇混合液洗脫，同時(shí)用高效液相色譜法(DAD檢測(cè)器)跟蹤檢測(cè)，所得京尼平苷酸和京尼平苷產(chǎn)品純度分別達(dá)98.69％和96.54％。并對(duì)制備型高效液相色譜制備京尼平苷和京尼平苷酸進(jìn)行了探討。 4．杜仲中京尼平苷和京尼平苷酸的純度測(cè)定和結(jié)構(gòu)鑒定。采用HPLC-DAD對(duì)杜仲提取液和分離純化中間產(chǎn)物進(jìn)行定性定量分析。通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定分析條件為：色譜柱， VP—ODS RP-18