昆侖雪菊中結合型降壓活性成分的分離與鑒定.pdf

1、昆侖雪菊在降血壓方面具有顯著功效而被廣泛應用于民間，然而因技術手段限制無法充分開發(fā)雪菊的價值，全面研究雪菊的功效具有重要意義。結合型昆侖雪菊活性成分因與細胞壁以共價鍵結合，難以直接用溶劑萃取出來。本研究采用堿降解法使結合型化合物釋放出來并通過響應面分析法優(yōu)化降解條件，在此基礎上利用不同溶劑對降解產物進行提取，并篩選出最佳的溶劑得到粗提物，利用常壓硅膠柱層析和SepdexLH-20凝膠柱層析對粗提物中的化合物進行分離純化得到單體化合物，采

2、用DPPH及ABTS法對單體化合物進行抗氧化活性評價，并通過體外ACE酶抑制試驗對單體化合物進行評價，得到以下結論。
　　(1)最佳的堿降解單因素條件為:時間為2h，溫度為50℃，NaOH濃度為2mol·L-1，最佳提取溶劑為正丁醇，在此基礎上設計了響應面試驗，得到最優(yōu)工藝參數(shù)為降解溫度56℃，堿液濃度1.65mol·L-1，降解時間2h，該工藝條件可使總黃酮得率達23.0908mg·g-1，驗證結果為23.067mg·g-1。所

3、選3因素的二次多項回歸方程為:Y=-27.6734+1.5389A+6.9080B+1.3468C-0.0663AB+0.0435AC+0.0525BC-0.0134A2-0.9845B2-0.9570C2。
　　(2)從粗提物中分離得到8個單體化合物，采用核磁共振技術(NMR)、電噴霧質譜技術(ESIMS)等鑒定其化學結構，8個單體化合物的結構分別為:4，6-二羥基-2-[6-羥基-1，5-二甲基4-己烯基]-5-苯甲基-β-D

4、-吡喃葡萄糖苷、金雞菊查爾酮4'-O-β-D-吡喃葡萄糖、香草醛、3'，4'，7，8-四羥基二氫黃酮、3'，4'，7，8-四羥基黃酮、2-苯乙基-β-D-吡喃葡萄糖苷、芳樟醇-3，6-氧合-β-D-吡喃葡萄糖苷、對香豆酸甲酯，其中4，6-二羥基-2-[6-羥基-1，5-二甲基-4-己烯基-5-苯甲基-β-D-吡喃葡萄糖苷為首次分離得到。
　　(3)活性測定結果表明化合物1、2、4、5具有較強的抗氧化能力，化合物1、2、4、5對DP

5、PH的半數(shù)抑制率IC50分別為92.21μmol·L-1、17.29μmol·L-1、70.09μmol·L-1和50.07μmol·L-1，對ABTS自由基半數(shù)抑制率IC50分別為43.06μmol·L-1、22.86μmol·L-1、33.40μmol·L-1和32.52μmol·L-1。
　　(4) ACE酶抑制活性表明化合物2、4、5具有較強的ACE酶抑制活性。化合物2、4、5對ACE酶的半數(shù)抑制率IC50分別為175.1