TM4SF9在母胎界面的表達及其在胚胎種植中作用的初步探索.pdf

1、目的：
　　研究四跨膜超家族成員9（TM4SF9）在母-胎界面的表達情況，探索其在胚胎種植中的可能作用，為自然流產及異位妊娠的機制研究提供新的研究結果和方向。
　　研究對象與方法：
　　1.研究對象：
　　①自然流產組：選取2012年2月-2014年1月就診于廣東省第二人民醫(yī)院婦科、產科、生殖醫(yī)學科的先兆流產、難免流產或超聲檢查發(fā)現(xiàn)胚胎停育（未見胎心搏動、無胚芽等）的患者共52例（流產組1、流產組2）；以正常早孕

2、和未妊娠育齡期女性為對照；
　?、谳斅压苋焉锝M：為2012年2月-2014年1月因“異位妊娠”在廣東省第二人民醫(yī)院婦科行診斷性刮宮和患側輸卵管切除術的患者共40例；以正常早孕、未妊娠育齡期女性及輸卵管絕育術患者為對照。
　　2.方法：
　　1）無菌條件下，收集患者術中吸出的絨毛、蛻膜、子宮內膜組織，及手術切除的輸卵管組織，采用免疫組化法檢測組織中TM4SF9的表達部位和水平；
　　2）G顯帶法對自然流產絨毛細胞行

3、核型分析。
　　結果：
　　第一部分 TM4SF9在自然流產母-胎界面的表達
　　1.絨毛中：
　　1）表達部位：在自然流產、正常早孕絨毛中，TM4SF9均表達于增殖活躍的細胞滋養(yǎng)層細胞和具有侵襲性的絨毛外滋養(yǎng)細胞的胞質和胞膜中，而合體滋養(yǎng)層細胞則未見表達。
　　2）表達水平：
　　① TM4SF9在染色體正常流產絨毛中的表達水平
　　TM4SF9在胚胎染色體正常的自然流產（流產組1）絨毛中表達

4、水平顯著低于正常早孕者，差異有統(tǒng)計學意義(IOD均值：53.22±35.47 Vs89.04±36.44；t=4.39，P=0.000)。
　?、赥M4SF9在染色體異常流產絨毛中的表達水平
　　然而，TM4SF9在胚胎染色體異常的流產組2中的表達水平顯著高于胚胎染色體正常流產組1，差異有統(tǒng)計學意義（IOD均值：140.43±61.76 Vs53.22±35.47，P=0.000）。
　　2.蛻膜/子宮內膜
　　

5、1）表達部位：
　　在未妊娠月經(jīng)期子宮內膜未見表達，而在增殖期和分泌期子宮內膜，自然流產和正常早孕蛻膜，及輸卵管妊娠術前診刮的的子宮內膜中，TM4SF9均表達于蛻膜/子宮內膜基質細胞（decidual/endometrial stromal cells，DSC/ESC）和腺上皮細胞（glandular epithelialcells）的胞質和胞膜。
　　2）表達水平：
　?、賂M4SF9在絨毛染色體正常流產蛻膜中的表達

6、水平
　　在絨毛染色體正常的流產組（流產組1）和正常早孕組蛻膜，及分泌期子宮內膜中，流產組1中TM4SF9表達最強（IOD均值：184.49±119.69）；正常早孕組次之（IOD均值：93.43±67.10）；分泌期子宮內膜中表達最弱（IOD均值：88.56±33.24）。3組總體均數(shù)相比差異有統(tǒng)計學意義（F=48.40，P=0.000）。
　　組間兩兩比較：自然流產組1和正常早孕蛻膜、分泌期子宮內膜相比，差異均有統(tǒng)計學意

7、義（P均=0.000）。
　?、赥M4SF9在絨毛染色體異常流產蛻膜中的表達水平
　　TM4SF9在胚胎染色體異常（流產組2）的流產蛻膜中的表達水平略低于胚胎染色體正常的流產組1，但差異無統(tǒng)計學意義（IOD均值：147.22±84.78 Vs184.49±119.69；t=1.10，P=0.278）。
　?、跿M4SF9在正常早孕蛻膜和未妊娠子宮內膜和中的表達水平
　　在增殖期、分泌期子宮內膜和正常早孕蛻膜中，正

8、常早孕組TM4SF9表達水平（IOD均值：93.43±67.10）略高于增殖期、分泌期子宮內膜（IOD均值：75.71±29.87、88.56±33.24），但3組總體均數(shù)相比，差異無統(tǒng)計學意義（F=1.26，P=0.296）。
　　第二部分 TM4SF9在輸卵管妊娠母-胎界面的表達
　　1.絨毛中：
　　1）表達部位
　　在輸卵管妊娠絨毛組織中，TM4SF9主要表達于細胞滋養(yǎng)細胞及絨毛外細胞滋養(yǎng)細胞（EVCT）

9、的胞漿和胞膜上，合體滋養(yǎng)細胞中無表達。
　　2）表達水平：
　?、賂M4SF9在輸卵管妊娠絨毛中的表達水平
　　TM4SF9在輸卵管妊娠絨毛中表達水平顯著高于正常早孕組，差異有統(tǒng)計學意義（IOD均值：109.39±61.84 Vs89.04±36.44；t=2.33，P=0.023）。
　　2.蛻膜/子宮內膜中
　　1）表達部位：
　　TM4SF9主要表達與蛻膜化或未蛻膜化的子宮內膜基質細胞及腺體上皮

10、細胞的胞質和胞膜。
　　2）表達水平：
　?、賂M4SF9在輸卵管妊娠子宮內膜中的表達水平
　　在輸卵管妊娠、未妊娠分泌期子宮內膜及正常早孕蛻膜中，輸卵管妊娠組TM4SF9表達最強（IOD均值：144.18±106.22）；正常早孕組次之（IOD均值：93.43±67.10）；分泌期子宮內膜表達水平最低（IOD均值：88.56±33.24）。3組總體均數(shù)相比差異有統(tǒng)計學意義（F=4.29，P=0.019）。組間兩兩比較

11、：輸卵管妊娠診刮子宮內膜與正常早孕蛻膜、未妊娠分泌期內膜相比，差異均有統(tǒng)計學意義（P分別為0.037、0.018）。
　?、赥M4SF9在輸卵管妊娠（蛻膜化/未蛻膜化）子宮內膜中的表達水平
　　TM4SF9在蛻膜化的子宮內膜中表達水平高于未蛻膜化的子宮內膜，但是差異無統(tǒng)計學意義（IOD均值：166.73±106.11 Vs119.25±100.31，t=1.47，P=0.151）。
　　3.在輸卵管粘膜中
　　1

12、）表達部位：
　　在輸卵管妊娠患者及輸卵管絕育術患者切除的輸卵管組織中，TM4SF9主要表達于輸卵管粘膜上皮的纖毛細胞及部分蛻膜化的輸卵管間質細胞的胞質和胞膜上，而分泌細胞則未見表達。
　　2）表達水平：
　　在未妊娠輸卵管粘膜、妊娠輸卵管粘膜和輸卵管妊娠子宮內膜中，妊娠輸卵管粘膜中TM4SF9表達水平最強（IOD均值：228.92±133.67）；輸卵管妊娠患者診刮的子宮內膜中水平其次（IOD均值：144.18±10

13、6.22）；未妊娠輸卵管粘膜中表達最弱（IOD均值：63.57±26.74）。3組總體均數(shù)比較，差異有統(tǒng)計學意義（F=57.89，P=0.000）。組間多重比較：妊娠輸卵管粘膜與未妊娠輸卵管粘膜、輸卵管妊娠子宮內膜相比，差異均有統(tǒng)計學意義（P分別為0.000、0.009）。
　　結論
　　1)綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)TM4SF9在母-胎界面廣泛表達，其表達水平的異?？赡芘c妊娠丟失及異位妊娠相關。
　　2)正常宮內妊娠的子宮