超聲造影評(píng)價(jià)腫瘤血管生成和抗腫瘤血管生成治療療效.pdf

1、自從腫瘤血管生成學(xué)說(shuō)提出以來(lái)，以腫瘤血管生成為靶點(diǎn)的抗血管生成治療已成為腫瘤治療的研究熱點(diǎn)，目前有大量的血管生成抑制藥物進(jìn)入臨床試驗(yàn)，少數(shù)幾個(gè)已在臨床應(yīng)用。但是腫瘤抗血管生成治療與常規(guī)細(xì)胞毒化療藥不同，不直接殺死腫瘤細(xì)胞，而是通過(guò)抑制腫瘤血管生成間接控制腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移，使腫瘤細(xì)胞處于穩(wěn)定狀態(tài)，通常會(huì)導(dǎo)致腫瘤壞死而不會(huì)導(dǎo)致腫瘤體積的改變[25-26]，故以WHO(WorldHealthOrganization)或RECIST(Repons

2、eEvaluationCriteriainSolidTumors)規(guī)定的病灶大小改變這一標(biāo)準(zhǔn)作為評(píng)價(jià)方法欠妥當(dāng)[27]，同時(shí)，抗腫瘤血管生成治療的藥物比較昂貴，并且有副作用，因此實(shí)驗(yàn)和臨床均迫切需要一種可靠的和無(wú)創(chuàng)的方法來(lái)評(píng)價(jià)腫瘤血管生成和抗腫瘤血管生成治療的早期療效。 組織學(xué)測(cè)量腫瘤內(nèi)微血管密度的方法是目前評(píng)價(jià)腫瘤血管生成最常用的方法，但是必須穿刺獲得組織標(biāo)本，是有創(chuàng)檢查。此外，微血管密度不能準(zhǔn)確區(qū)分腫瘤內(nèi)有功能和無(wú)功能的血管

3、。因此，其在評(píng)價(jià)腫瘤抗血管生成治療方面具有許多局限性。 由于抗腫瘤血管生成治療靶向作用于腫瘤內(nèi)異常的新生血管，因此會(huì)引起腫瘤血容量、血流量及其它血流灌注動(dòng)力學(xué)指標(biāo)的改變，監(jiān)測(cè)這些指標(biāo)的改變有望成為臨床上監(jiān)測(cè)抗血管生成治療療效的有效指標(biāo)。多種無(wú)創(chuàng)的功能性成像方法(包括CT、MRI、PET和超聲等)都嘗試通過(guò)評(píng)價(jià)腫瘤血流灌注來(lái)評(píng)價(jià)腫瘤血管生成和抗血管生成治療療效。超聲檢查由于具有實(shí)時(shí)、無(wú)輻射、費(fèi)用低廉、可反復(fù)進(jìn)行以及能夠直接評(píng)價(jià)血流

4、灌注等優(yōu)點(diǎn)，在評(píng)價(jià)腫瘤血管生成和抗血管生成治療中起著重要作用。已有研究報(bào)道彩色多普勒超聲能夠檢測(cè)出抗血管生成治療后腫瘤內(nèi)較大血管減少。但是彩色多普勒超聲即使在使用了造影劑的情況下也不能顯示毛細(xì)血管內(nèi)的血流信號(hào)。近幾年來(lái)，灰階超聲造影技術(shù)迅速發(fā)展，明顯提高了對(duì)低速血流的檢測(cè)能力，使評(píng)價(jià)組織內(nèi)毛細(xì)血管的血流成為可能。另一方面，一定濃度范圍內(nèi)，超聲造影的信號(hào)強(qiáng)度與血液內(nèi)微泡濃度存在線(xiàn)性關(guān)系，利用時(shí)間—強(qiáng)度曲線(xiàn)軟件對(duì)超聲造影過(guò)程進(jìn)行定量分析，可

5、以得出有關(guān)組織血流灌注的參數(shù)，如血容量、血流量和灌注量等。 沙利度胺又名反應(yīng)停，國(guó)內(nèi)外的實(shí)驗(yàn)和臨床研究均已證實(shí)其具有抗血管生成作用[2-5]。Ⅱ期臨床研究中沙利度胺對(duì)腎細(xì)胞癌、前列腺癌、肝細(xì)胞癌具有很好的療效，該藥已進(jìn)入Ⅲ期臨床試驗(yàn)。最近有研究發(fā)現(xiàn)，許多傳統(tǒng)的化療藥在低劑量、高頻率的給藥方式下具有明顯的血管生成抑制效應(yīng)。本研究通過(guò)建立沙利度胺和低劑量順鉑抗血管生成治療小鼠H22肝癌皮下移植瘤動(dòng)物模型，系統(tǒng)探討常規(guī)灰階超聲造影以及

6、定量分析在評(píng)價(jià)腫瘤血管生成和抗腫瘤血管生成治療中的作用。 第一部分常規(guī)灰階超聲造影評(píng)價(jià)抗血管生成治療小鼠肝癌 目的：應(yīng)用常規(guī)灰階超聲造影評(píng)價(jià)沙利度胺治療小鼠H22肝癌皮下移植瘤的療效，探討常規(guī)灰階超聲造影在評(píng)價(jià)抗腫瘤血管生成治療中的作用。 方法：建立小鼠H22肝癌皮下移植瘤模型，隨機(jī)分為2組：對(duì)照組和治療組，治療組在瘤株皮下接種24h后給予沙利度胺(200mg/kg體重)灌胃，對(duì)照組給予0.5％羧甲基纖維素鈉灌胃

7、，每天一次，連續(xù)給藥7天。末次給藥24h后行灰階超聲造影檢查。測(cè)量腫瘤增強(qiáng)時(shí)最大橫切面的面積和無(wú)強(qiáng)化區(qū)面積，計(jì)算無(wú)強(qiáng)化區(qū)面積百分比。超聲檢查完成后處死小鼠，完整切除腫瘤，常規(guī)10％福爾馬林固定，石蠟包埋，HE染色，測(cè)量腫瘤壞死面積。 結(jié)論：常規(guī)灰階超聲造影可以在腫瘤體積發(fā)生改變前檢測(cè)出抗血管生成治療引起的腫瘤內(nèi)血流灌注的變化。 第二部分超聲造影定量分析(團(tuán)注法)評(píng)價(jià)抗血管生成治療小鼠肝癌 目的：應(yīng)用超聲造影定量分

8、析的方法(團(tuán)注法)評(píng)價(jià)沙利度胺和低劑量順鉑治療小鼠H22肝癌的療效，探討超聲造影定量分析組織血流灌注參數(shù)改變?cè)谠u(píng)價(jià)抗腫瘤血管生成治療中的作用。 方法：建立小鼠H22肝癌皮下移植瘤模型，隨機(jī)分為4組，各模型自建立次日起分別經(jīng)腹腔注射0.5％羧甲基纖維素鈉(A組)、順鉑(1mg/kg體重)(B組)、沙利度胺(100mg/kg體重)(C組)和沙利度胺(200mg/kg體重)(D組)，每天一次，連續(xù)給藥7天。末次給藥24h后行灰階超聲造

9、影檢查并測(cè)量腫瘤無(wú)強(qiáng)化區(qū)面積百分比。采用SonoLiverV2.6.6超聲造影定量分析軟件進(jìn)行脫機(jī)分析，獲取曲線(xiàn)下面積(AUC)、峰值強(qiáng)度(IMAX)、灌注指數(shù)(PI)、平均通過(guò)時(shí)間(mTT)、峰值時(shí)間(TTP)和擬合優(yōu)度(GOF)等參數(shù)。超聲檢查完成后處死小鼠，完整剝離腫瘤，免疫組化檢測(cè)腫瘤CD34表達(dá)情況，計(jì)算微血管密度(MVD)。 結(jié)論：超聲定量分析(團(tuán)注法)可以通過(guò)監(jiān)測(cè)腫瘤的血流灌注參數(shù)的改變來(lái)有效評(píng)價(jià)沙利度胺和低劑量順

10、鉑抗血管生成治療的治療效果：峰值強(qiáng)度、曲線(xiàn)下面積和灌注指數(shù)可以有效反映沙利度胺和低劑量順鉑抗血管生成治療引起的腫瘤血流灌注改變。同時(shí)，灌注參數(shù)(峰值強(qiáng)度和灌注指數(shù))可以在一定程度反映腫瘤血管生成狀況。 第三部分超聲造影定量分析組織血流量(擊破—再灌注法)評(píng)價(jià)抗血管生成治療小鼠肝癌 目的：應(yīng)用超聲造影擊破—再灌注法定量分析沙利度胺和低劑量順鉑治療小鼠H22肝癌的療效，探討超聲造影擊破—再灌注法測(cè)定組織血流量改變?cè)谠u(píng)價(jià)抗腫瘤

11、血管生成治療中的作用。 方法：建立小鼠H22肝癌皮下移植瘤模型，隨機(jī)分為4組，各模型自建立次日起分別經(jīng)腹腔注射0.5％羧甲基纖維素鈉(A組)、順鉑(1mg/kg體重)(B組)、沙利度胺(100mg/kg體重)(C組)和沙利度胺(200mg/kg體重)(D組)，每天一次，連續(xù)給藥7天。末次給藥24h后采用擊破—再灌注的方法行灰階超聲造影檢查并測(cè)量腫瘤無(wú)強(qiáng)化區(qū)面積百分比，然后采用指數(shù)函數(shù)進(jìn)行擬合分析，計(jì)算血流量。超聲檢查完成后處死小

12、鼠，完整切除腫瘤，免疫組化檢測(cè)腫瘤CD34表達(dá)情況，計(jì)算微血管密度(MVD)。 結(jié)論：超聲造影擊破—再灌注定量測(cè)定腫瘤血流量的方法在評(píng)價(jià)腫瘤抗血管生成治療方面優(yōu)于常規(guī)灰階超聲造影及半定量測(cè)量血流灌注參數(shù)的方法，可以有效監(jiān)測(cè)腫瘤抗血管生成的治療效果。同時(shí)血流量可以在一定程度反映腫瘤血管生成狀況。 第四部分超聲造影定量分析(團(tuán)注法)動(dòng)脈相血流灌注參數(shù)在肝細(xì)胞癌和肝局灶性結(jié)節(jié)增生鑒別診斷中的價(jià)值 目的：探討超聲造影定量

13、分析動(dòng)脈相血流灌注參數(shù)在肝局灶性結(jié)節(jié)增生(FNH)和肝細(xì)胞肝癌(HCC)鑒別診斷中的價(jià)值。 方法：經(jīng)肘靜脈團(tuán)注聲諾維(2.4 ml)造影劑后利用時(shí)間—強(qiáng)度曲線(xiàn)分析軟件對(duì)17例肝局灶性結(jié)節(jié)增生患者19個(gè)病灶(FNH組)和41例肝細(xì)胞肝癌患者41個(gè)病灶(HCC組)的動(dòng)脈相血流灌注參數(shù)(到達(dá)時(shí)間，峰值時(shí)間和峰值強(qiáng)度)進(jìn)行測(cè)定，并計(jì)算出增強(qiáng)斜率和增強(qiáng)時(shí)間，對(duì)這些參數(shù)進(jìn)行對(duì)照分析。 結(jié)論： 1.沙利度胺(200mg/kg灌

14、胃)治療小鼠H22肝癌，雖然不會(huì)引起腫瘤體積的顯著改變，但會(huì)導(dǎo)致腫瘤的壞死顯著增加。 2.超聲造影測(cè)定的腫瘤無(wú)強(qiáng)化面積與病理測(cè)量的腫瘤壞死面積具有很好的相關(guān)性。 3.常規(guī)灰階超聲造影可以在腫瘤體積發(fā)生改變以前檢測(cè)出腫瘤內(nèi)血流灌注的改變。 4.眼眶后靜脈和鼠尾靜脈兩種超聲造影劑注射方式對(duì)超聲造影定量分析的組織血流灌注參數(shù)無(wú)影響。 5.沙利度胺100mg/kg或200mg/kg和低劑量順鉑腹腔注射均可明顯抑制

15、小鼠H22肝癌的生長(zhǎng)，但三者的抑瘤效果無(wú)明顯差異。 6.沙利度胺和低劑量順鉑化療在抑制小鼠H22肝癌生長(zhǎng)的同時(shí)會(huì)引起腫瘤血流灌注的改變。 7.沙利度胺和低劑量順鉑化療均可以明顯抑制H22肝癌的血管生成。 8.超聲造影定量分析(團(tuán)注法和擊破—再灌注法)可以通過(guò)監(jiān)測(cè)腫瘤的血流灌注的改變來(lái)有效評(píng)價(jià)沙利度胺和低劑量順鉑的治療效果。 9.超聲造影定量分析(團(tuán)注法和擊破—再灌注法)能夠在腫瘤發(fā)生明顯壞死前發(fā)現(xiàn)抗腫瘤血

16、管生成治療引起的腫瘤血流灌注的變化，比單純灰階超聲造影(測(cè)量腫瘤的無(wú)強(qiáng)化面積百分比)可以更有效的監(jiān)測(cè)腫瘤抗血管生成治療的效果。 10.超聲造影擊破—再灌注法在評(píng)價(jià)腫瘤血流灌注方面優(yōu)于團(tuán)注法。 11.超聲造影擊破—再灌注定量測(cè)定腫瘤血流量的方法能夠比微血管密度更敏感區(qū)分沙利度胺和低劑量順鉑治療所引起的腫瘤血流灌注改變； 12.超聲造影定量分析(團(tuán)注法和擊破再灌注)測(cè)定腫瘤血流灌注能夠在一定程度上反映腫瘤的血管生成狀