五子衍宗方對環(huán)磷酰胺致小鼠肝臟DNA損傷的保護作用及機制研究.pdf

1、目的:通過腹腔注射環(huán)磷酰胺建立小鼠DNA損傷模型,探討五子衍宗方對環(huán)磷酰胺造成的肝臟DNA損傷的保護作用,并研究其作用機制。
　　方法:將Babl/C小鼠隨機分為正常對照組、模型組、五子衍宗方低、高劑量組。五子衍宗方低劑量(100 mg/kg),五子衍宗方高劑量組(200 mg/kg)預(yù)給藥一周之后,除正常對照組之外,其余各組腹腔注射環(huán)磷酰胺100 mg/kg三次,隔天給藥,同時五子衍宗方低,高劑量組繼續(xù)給藥,末次給予環(huán)磷酰胺后禁

2、食12h處死小鼠。檢測小鼠的體重,肝臟重量,肝臟指數(shù),血清中丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)活力,HE染色檢測肝臟的組織病理學(xué)變化,單細(xì)胞凝膠電泳技術(shù)檢測肝臟細(xì)胞的DNA損傷,檢測肝臟勻漿中谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性及丙二醛(MDA)的含量,Elisa檢測肝臟和血清中8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)的含量,PCR檢測肝臟中SOD1 mRNA、SOD2 mRNA、SOD3 mRNA表

3、達,Western blot檢測肝臟組織中γ-H2AX、Ku70的蛋白表達,免疫熒光檢測53BP1的表達。
　　結(jié)果:五子衍宗方能夠升高小鼠的體重,肝臟重量,肝臟指數(shù),降低ALT、AST的活力(P<0.05或P<0.01);HE染色發(fā)現(xiàn)五子衍宗方組減輕肝臟組織細(xì)胞腫脹和空泡變性;低、高劑量的五子衍宗方均可以改善肝臟的DNA的損傷,降低小鼠肝臟中的Olive尾矩、尾距、尾長和尾部DNA含量(P<0.05或P<0.01);五子衍宗方可

4、以提高機體的抗氧化能力,體現(xiàn)在降低肝臟和血清中的8-OHdG的含量,降低肝臟中MDA的含量,提高SOD和GPX的活力,提高SOD1 mRNA、SOD2 mRNA、SOD3 mRNA的表達(P<0.05或P<0.01);五子衍宗方通過升高肝臟中ku70的蛋白表達,降低γ-H2AX和53BP1的表達,提高機體的修復(fù)DNA損傷的能力,促進DNA修復(fù)。(P<0.05或P<0.01)。
　　結(jié)論:五子衍宗方能夠減輕CTX引起的小鼠肝臟的DN