糖尿病小鼠眼Opticin蛋白表達(dá)的研究.pdf

1、目的: Opticin是一種富含亮氨酸的非膠原蛋白，與玻璃體性狀的穩(wěn)定密切相關(guān)。本研究通過定量對比已發(fā)生糖尿病的非肥胖性糖尿病小鼠(Non—Obese Diabeticmice，NOD)與未發(fā)生糖尿病的NOD小鼠眼內(nèi)opticin表達(dá)的差異，探索糖尿病小鼠模型玻璃體、視網(wǎng)膜組織中opticin表達(dá)的規(guī)律，建立糖尿病眼與玻璃體、視網(wǎng)膜opticin表達(dá)的相關(guān)性。 方法: 實(shí)驗(yàn)組為10只連續(xù)2次血糖≥16.7mmol/L，診斷為糖尿

2、病的NOD小鼠。對照組采用未發(fā)生糖尿病的NOD小鼠(n=10)．摘除眼球后，冰凍狀態(tài)下，顯微鏡下自角膜緣切開眼球，鈍性完整分離出玻璃體、視網(wǎng)膜、鞏膜。采用Western blot、實(shí)時(shí)定量PCR檢測opticin蛋白表達(dá)以及相關(guān)基因(OPTC)mRNA表達(dá)的差異，SPSS11.0軟件t檢驗(yàn)對比兩組間的差異。 結(jié)果: (1)Western blot檢測在NOD小鼠的玻璃體、視網(wǎng)膜、鞏膜中，感光底片上在相對分子量55KD～7

3、2KD之間，大約在60KD處均可看到陽性條帶，發(fā)現(xiàn)有opticin蛋白的表達(dá)，玻璃體、視網(wǎng)膜、鞏膜中的含量依次遞減。糖尿病NOD小鼠玻璃體中opticin含量比對照組顯著降低(t=4.42；P＜0.01)．視網(wǎng)膜中opticin含量比對照組顯著降低(t=4.58；P＜0.01)．鞏膜中opticin蛋白含量較少，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-0.27；P＞0.05)。 (2)實(shí)時(shí)定量PCR檢測OPTC基因mRNA表達(dá)，在NOD小鼠的玻

4、璃體、視網(wǎng)膜、鞏膜中均檢測到OPTC基因的mRNA。未發(fā)生糖尿病的NOD小鼠其玻璃體中的OPTCmRNA表達(dá)明顯高于糖尿病NOD小鼠(t=3.297；P＜0.05)。視網(wǎng)膜中OPTCmRNA表達(dá)對照組高于實(shí)驗(yàn)組(t=2.484；P＜0.05)。鞏膜中OPTCmRNA表達(dá)的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.269；P＞0.05)． 結(jié)論: opticin蛋白在小鼠的玻璃體、視網(wǎng)膜、鞏膜中有表達(dá)，玻璃體中含量最豐富；糖尿病NOD小鼠中玻璃體