去甲斑蝥酸鈉對(duì)耐順鉑人肺腺癌細(xì)胞系A(chǔ)549-DDP的逆轉(zhuǎn)作用及可能分子機(jī)制.pdf

1、目的： 探討去甲斑蝥酸鈉（SNCTD）對(duì)耐順鉑人肺腺癌細(xì)胞系A(chǔ)549/DDP的逆轉(zhuǎn)作用及可能分子機(jī)制。 方法： 1．采用CCK法篩選出SNCTD對(duì)A549/DDP的無(wú)毒濃度，并檢測(cè)出順鉑及與無(wú)毒濃度SNCTD聯(lián)合對(duì)耐藥細(xì)胞株的IC50。 2．光學(xué)顯微鏡下觀察無(wú)毒濃度SNCTD組，單純DDP處理組及聯(lián)合用藥組用藥48h細(xì)胞形態(tài)的變化。 3．采用流式細(xì)胞儀觀察用藥48h后正常細(xì)胞組，無(wú)毒濃度SNCTD

2、組，順鉑組及聯(lián)合用藥組對(duì)A549/DDP細(xì)胞周期的影響，同時(shí)分別檢測(cè)1、2倍無(wú)毒濃度SNCTD對(duì)細(xì)胞內(nèi)羅丹明123的蓄積情況。 4．采用逆轉(zhuǎn)錄-多聚酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）檢測(cè)1、2倍無(wú)毒濃度SNCTD處理細(xì)胞48h、72h后耐藥相關(guān)基因mdr1mRNA，MRP1mRNA，GST-PimRNA，ERCC1mRNA表達(dá)。 結(jié)果： 1．SNCTD對(duì)A549/DDP的無(wú)毒濃度為5ug/ml，與順鉑聯(lián)合用藥降低A549/

3、DDP的耐藥性，逆轉(zhuǎn)倍數(shù)為1．97。 2．無(wú)毒濃度SNCTD處理耐藥細(xì)胞組光學(xué)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)未見(jiàn)明顯改變，而聯(lián)合用藥組比單純順鉑作用后細(xì)胞形態(tài)明顯變差。 3．無(wú)毒濃度SNCTD處理耐藥細(xì)胞后細(xì)胞周期未見(jiàn)明顯改變，單純順鉑處理后細(xì)胞阻滯在S期，聯(lián)合用藥后S期減少，G0/1期細(xì)胞增多。無(wú)毒濃度SNCTD處理耐藥細(xì)胞48h后細(xì)胞內(nèi)羅丹明123熒光強(qiáng)度明顯增強(qiáng)（P<0．05）。 4．1、2倍無(wú)毒濃度SNCTD處理耐藥細(xì)