去甲斑蝥酸鈉對耐順鉑人肺腺癌細胞系A(chǔ)549-DDP的逆轉(zhuǎn)作用及可能分子機制.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的: 探討去甲斑蝥酸鈉(SNCTD)對耐順鉑人肺腺癌細胞系A(chǔ)549/DDP的逆轉(zhuǎn)作用及可能分子機制。 方法: 1.采用CCK法篩選出SNCTD對A549/DDP的無毒濃度,并檢測出順鉑及與無毒濃度SNCTD聯(lián)合對耐藥細胞株的IC50。 2.光學顯微鏡下觀察無毒濃度SNCTD組,單純DDP處理組及聯(lián)合用藥組用藥48h細胞形態(tài)的變化。 3.采用流式細胞儀觀察用藥48h后正常細胞組,無毒濃度SNCTD

2、組,順鉑組及聯(lián)合用藥組對A549/DDP細胞周期的影響,同時分別檢測1、2倍無毒濃度SNCTD對細胞內(nèi)羅丹明123的蓄積情況。 4.采用逆轉(zhuǎn)錄-多聚酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測1、2倍無毒濃度SNCTD處理細胞48h、72h后耐藥相關(guān)基因mdr1mRNA,MRP1mRNA,GST-PimRNA,ERCC1mRNA表達。 結(jié)果: 1.SNCTD對A549/DDP的無毒濃度為5ug/ml,與順鉑聯(lián)合用藥降低A549/

3、DDP的耐藥性,逆轉(zhuǎn)倍數(shù)為1.97。 2.無毒濃度SNCTD處理耐藥細胞組光學顯微鏡下細胞形態(tài)未見明顯改變,而聯(lián)合用藥組比單純順鉑作用后細胞形態(tài)明顯變差。 3.無毒濃度SNCTD處理耐藥細胞后細胞周期未見明顯改變,單純順鉑處理后細胞阻滯在S期,聯(lián)合用藥后S期減少,G0/1期細胞增多。無毒濃度SNCTD處理耐藥細胞48h后細胞內(nèi)羅丹明123熒光強度明顯增強(P<0.05)。 4.1、2倍無毒濃度SNCTD處理耐藥細

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