黃芩DNA指紋分析及質(zhì)量相關(guān)研究.pdf

1、本實驗對黑龍江、河北、山東、山西、陜西、內(nèi)蒙、甘肅、大連等不同產(chǎn)地，及黑龍江、江西、陜西等不同種類(野生、人工種植)的黃芩樣本共20份進行了DNA指紋分析，并對質(zhì)量的高低與DNA指紋圖譜的相關(guān)性進行了研究?！　?、從100個RAPD引物和30個ISSR引物中分別篩選出12和6個擴增條帶清晰，擴增結(jié)果穩(wěn)定的引物。其中，3個RAPD引物和2個ISSR引物擴增出的條帶可以將高、中、低緯度的黃芩分開。用篩選出的引物對所有黃芩樣本進行PCR擴增

2、，得到DNA指紋圖譜，同時對電泳條帶進行基于遺傳相似度的聚類分析。從DNA指紋圖中可見高、中、低緯度的黃芩內(nèi)部用同一引物擴增出的條帶基本相同；在高、中、低緯度的黃芩之間，僅有少數(shù)引物得到可以明確區(qū)分三者的不同條帶。計算不同居群內(nèi)部的遺傳相似度為0.936(高緯度)、0.954(中緯度)、0.892(低緯度)。這與指紋圖顯示的信息一致，即不同緯度黃芩間的遺傳有一定的變異，而居群內(nèi)部的變異很小?！　?、采用高效液相色譜法(中國藥典2000

3、年版一部黃芩標準中含量的測定方法)及毛細管電泳法，分別測定黃芩中黃芩苷的含量，經(jīng)方法學驗證，兩種方法均符合要求，具有較好的相關(guān)性(r=0.9621)。產(chǎn)于河北承德的野生黃芩中黃芩苷含量最高，平均為18.5％。產(chǎn)于黑龍江及江西、陜西的野生及人工栽培品種含量比較結(jié)果，黑龍江野生品種與人工種植品種相比含量相近；江西、陜西的人工種植品種黃芩苷含量明顯高于當?shù)匾吧贩N。　　3、DNA指紋圖譜與質(zhì)量相關(guān)性研究結(jié)果表明：雖然不同品種的同一引物擴增出