用于慢粒白血病基因檢測(cè)的DNA電化學(xué)生物傳感器研究.pdf

1、DNA電化學(xué)生物傳感器是近幾年迅速發(fā)展起來(lái)的一種全新的生物傳感器，它是進(jìn)行核酸結(jié)構(gòu)分析和檢測(cè)的重要手段之一，其特點(diǎn)是測(cè)定快速、簡(jiǎn)便、靈敏、價(jià)廉。 本文利用共價(jià)結(jié)合法，首次將人工合成的慢?；蚱巫鰹樘禺愋蕴结樄潭ㄔ诓Ｌ茧姌O表面，結(jié)合電活性指示劑MB構(gòu)建DNA電化學(xué)傳感器。同時(shí)探討了電極活化和未活化對(duì)檢測(cè)的影響，總結(jié)出固定前電極應(yīng)在磷酸鹽中恒電壓氧化活化，探針固定濃度為100μg/mL。利用研制的DNA電化學(xué)生物傳感器對(duì)溶液中標(biāo)準(zhǔn)

2、的互補(bǔ)DNA定性和定量檢測(cè)，并在此基礎(chǔ)上探討了指示劑的選擇，指示劑MB作用時(shí)間、作用濃度，雜交底液對(duì)電化學(xué)檢測(cè)的影響。同時(shí)考察了傳感器的穩(wěn)定性、特異性等基本性能。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，MB是一種特異性較強(qiáng)的指示劑，能夠有效地區(qū)分互補(bǔ)與非互補(bǔ)序列。上述制成的DNA電化學(xué)生物傳感器，在Tris-HCl(pH7.0)底液中，指示劑MB濃度20μM，與6.75×10-7mol/L完全互補(bǔ)的雜交單鏈45℃雜交30分鐘，檢測(cè)信號(hào)效果良好。利用DN

3、A電化學(xué)傳感器檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)DNA樣品，檢測(cè)下限達(dá)到5.9×10-8mol/L，在1.25×10-7～6.75×10-7mol/L濃度范圍內(nèi)，檢測(cè)信號(hào)與互補(bǔ)DNA濃度成一次線性關(guān)系，并有著良好的重復(fù)性和特異性。 為了提高檢測(cè)慢?；虻撵`敏度，本文嘗試將納米粒子引入DNA生物傳感器。碳納米管由于其獨(dú)特的結(jié)構(gòu)特性，對(duì)某些生物分子的電化學(xué)反應(yīng)有較好的催化作用，能較大范圍地提高電化學(xué)響應(yīng)信號(hào)。本實(shí)驗(yàn)研究了碳納米管的純化制備和表征，并探討了不同