溪黃草抗乙肝活性部位研究及抗腫瘤研究.pdf

1、目的：從溪黃草中尋找抗乙型肝炎的活性物質(zhì)，提取分離具有抗腫瘤的作用的組分，為尋找抗腫瘤作用的模型分子奠定基礎(chǔ)。 方法：采用紫外分光光度法測(cè)定總黃酮含量，來優(yōu)化溪黃草的提取工藝，將粗提物作用于HepG2.2.15細(xì)胞，以HepG2.2.15細(xì)胞培養(yǎng)上清中HBsAg和HBeAg分泌變化作為指標(biāo)，評(píng)價(jià)提取物抗乙肝病毒活性；采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR測(cè)上清液中HBV DNA含量的變化，進(jìn)一步驗(yàn)證溪黃草粗提物抗乙肝病毒作用。將粗提物用石油醚(

2、沸程60～90)，乙酸乙酯，正丁醇溶劑進(jìn)行萃取，萃取組分分別作用于HepG2.2.15細(xì)胞，根據(jù)HBsAg和HBeAg抑制率和治療指數(shù)，選出綜合指標(biāo)最好的萃取組分進(jìn)行硅膠柱層析分離，用TLC即薄層色譜進(jìn)行監(jiān)測(cè)，得到不同組分，將這些組分分別作用于HepG2.2.15細(xì)胞。根據(jù)HBsAg和HBeAg抑制率和治療指數(shù)確定溪黃草抗乙肝病毒活性部位。 溪黃草經(jīng)50％乙醇提取，乙酸乙酯萃取再經(jīng)過硅膠柱層析分離后所得三個(gè)組分對(duì)HepG2.2.

3、15細(xì)胞毒性大，將這三個(gè)組分作為樣品，MCF-7細(xì)胞，BGC-823細(xì)胞，HepG2細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，采用MTT實(shí)驗(yàn)，及細(xì)胞凋亡流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行溪黃草部分分離組分抗腫瘤作用研究。 結(jié)果：溪黃草50％乙醇提取物具有抗HBV的作用，對(duì)HBsAg治療指數(shù)為1.9，對(duì)HBeAg治療指數(shù)為1.99。乙酸乙酯部位在1.5mg/mL最大濃度時(shí)為無毒濃度，對(duì)HBsAg和HBeAg的抑制率分別為53.1％和52.46％，治療指數(shù)分別為2.3和2