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文檔簡介
1、目的:①自體移植法建立內(nèi)異癥大鼠模型,觀察成模情況。②觀察內(nèi)異癥移植灶情況對大鼠生育力的影響。③比較各組MUC-1、Galectin-3的mRNA和蛋白質(zhì)的表達,探討二者對子宮內(nèi)膜異位癥大鼠模型生育力的影響。
方法:48只8周齡雌性S-D大鼠隨機分為內(nèi)異癥組(Em)32只、假手術組(Sham)8只和空白對照組(Norm)8只,對Em組采用自體移植法建模。4周后剖腹探查成模情況,取建模成功者共25只行進一步實驗。上述3組符合
2、條件的雌鼠與雄性大鼠按2∶1合籠,從行陰道涂片見精子之日起分籠飼養(yǎng),第10日處死大鼠結(jié)束實驗并計數(shù)胚胎數(shù)。進一步分為妊娠組和非妊娠組。留取所有大鼠子宮和移植灶HE染色行相關組織學檢查、免疫組化實驗對MUC-1、Galectin-3蛋白的表達進行檢測;熒光定量PCR(real time PCR)實驗對MUC-1、Galectin-3mRNA的表達進行檢測。
結(jié)果:⑴自體移植法移植的子宮組織可以存活,移植成活率可達89.29%
3、。Em組胚胎著床數(shù)為6.33±1.23胎(n=17);Sham組的胚胎著床數(shù)為8.57±1.51胎(n=6);Norm組的胚胎著床數(shù)為6.81±0.65胎(n=8),組間比較有統(tǒng)計學意義(P=0.01)。對Em組大鼠來說,Person相關性分析顯示,合籠前移植灶評分的高低與妊娠10天時胚胎著床數(shù)呈明顯負相關性(r=-0.568,P=0.03),評分越高,胚胎著床數(shù)越低。⑵免疫組化:MUC-1在子宮內(nèi)膜及移植灶的腔上皮、腺上皮和間質(zhì)細胞的
4、胞質(zhì)中均有表達。MUC-1在妊娠期時Em組、Sham組及Norm組各組陽性染色細胞數(shù)分別為19.35%、21.17%和23.13%,組間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。MUC-1在非妊娠期Em組子宮組織中陽性染色細胞占28.75%,非妊娠期Norm組子宮組織中陽性染色細胞占57.25%,后者明顯高于前者,組間差異有統(tǒng)計學意義(P=0.00)。MUC-1在非妊娠期移植灶陽性染色細胞占66.88%,而妊娠期移植灶的陽性染色細胞只占24.2
5、9%,后者較前者下降42.59%。Galectin-3在子宮內(nèi)膜及移植灶的腔上皮、腺上皮的胞質(zhì)中均有表達。在妊娠期Em組、Sham組及Norm組陽性染色細胞數(shù)分別為20.76%、22.33%和25.62%,組間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。Galectin-3在非妊娠期Em組子宮組織中陽性染色細胞占29.12%,非妊娠期Norm組子宮組織中陽性染色細胞占63.13%,后者明顯高于前者,組間差異有統(tǒng)計學意義(P=0.00)。Galec
6、tin-3在非妊娠期移植灶陽性染色細胞占73.38%,而妊娠期移植灶的陽性染色細胞只占23.18%,后者較前者下降50.2%。⑶Real time PCR結(jié)果:妊娠期,Sham組和Norm組的MUC-1mRNA的表達量均較Em組高,分別是其2.28倍和2.16倍,三組組間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。非妊娠期正常子宮組織MUC-1 mRNA相對表達量是Em未孕組的1.19倍;非妊娠期移植灶MUC-1mRNA相對表達量是妊娠期移植灶的
7、2.99倍;在非妊娠期,Em組移植灶MUC-1mRNA相對表達量是子宮組織的2.01倍。妊娠期,Sham組和Norm組的Galectin-3mRNA的表達量均較Em組高,分別是其2.08倍和2.21倍,三組組間差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。非妊娠期正常子宮組織Galectin-3mRNA相對表達量是Em未孕組的1.15倍;非妊娠期移植灶上Galectin-3mRNA相對表達量是妊娠期移植灶的2.51倍;在非妊娠期,Em組移植灶Gal
8、ectin-3mRNA相對表達量是子宮組織的1.69倍。MUC-1mRNA、Galectin-3mRNA的表達量與胚胎著床數(shù)的相關性:子宮MUC-1 mRNA相對量與著床數(shù)均呈正相關趨勢,達到統(tǒng)計學顯著水平(EM:r=0.834,P=0.00; Sham: r=0.803,P=0.03)。子宮Galectin-3mRNA相對量與著床數(shù)均呈正相關趨勢,達到統(tǒng)計學顯著水平(EM: r=0.866,P=0.00; Sham:r=0.763,P
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