胃上部與胃下部癌臨床病理特點(diǎn)及PTEN、AKT mRNA和蛋白表達(dá)的對比研究.pdf

1、目的： 通過對胃上部癌與胃下部癌病例臨床病理資料和隨訪結(jié)果進(jìn)行回顧性分析，探討二者在臨床特點(diǎn)、組織學(xué)分化、分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率、生存率等方面的差異。進(jìn)一步對胃上部癌、胃下部癌及癌旁組織中PTEN和AKT基因mRNA的表達(dá)、蛋白表達(dá)水平進(jìn)行定位和定量分析，探討與臨床病理特征的關(guān)系及其在胃上、下部癌發(fā)生發(fā)展中的意義。 方法： 從1999年1月至2003年12月中國醫(yī)大一院的胃癌手術(shù)中，篩選出資料完整的胃上部癌(U組)7

2、3例、胃下部癌(L組)366例，進(jìn)行臨床病理資料和生存時間的統(tǒng)計分析。收集遼寧省人民醫(yī)院外科2003年1月至2006年10月手術(shù)標(biāo)本，胃上部癌35例和胃下部癌54例，取原發(fā)灶癌組織及距癌灶5cm以上的組織做正常對照，進(jìn)行一步法RT-PCR檢測PTEN和AKT mRNA表達(dá)，應(yīng)用SABC免疫組織化學(xué)染色方法和免疫蛋白印跡雜交方法分析PTEN、AKT和磷酸化AKT(phosphorylated AKT，pAKT)蛋白在胃上、下部癌中表達(dá)的差

3、異。 結(jié)果： 一、臨床病理資料分析結(jié)果 U組男性明顯多于女性(P<0.01)，男女比為4.21:1，明顯高于L組的1.49:1。U組腫塊直徑>5cm的病例明顯多于L組(34/73 vs 126/366，P<0.05)。L組生長方式為團(tuán)塊性者多于U組(102/366 vs 10/73，P<0.05)，而U組生長方式為彌漫性者多于L組(39/73 vs 147/366，P<0.05)。U組中早期胃癌明顯少于L組(3/

4、73vs76/366，P<0.01)，而進(jìn)行期胃癌居多。進(jìn)行期胃癌中又以晚期居多，Borrmann3型明顯多于L組(54/73 vs 222/366，P<0.05)。 TNM分期結(jié)果顯示，U組中T1期明顯少于L組(5/73 vs 74/366，P<0.01)，T3期明顯多于L組(19/73 vs 58/366，P<0.05)，T4期明顯多于L組(10/73 vs 21/366，P<0.05)。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移上看，U組中N2+N3期明

5、顯多于L組(22/73 vs 68/366，P<0.05)。U組病理類型以低未分化型為主，明顯多于L組(46/73 vs 184/366，P<0.05)。手術(shù)程度上看，U組以B級(相對根治)和C級(姑息手術(shù))為主，A級(絕對根治)明顯少于L組(31/73 vs 207/366，P<0.05)。 二、生存分析 U組中位生存期為42個月，L組中位生存期為60個月。U組5年生存率明顯低于L組(27.4％ vs 49.5％，P<

6、0.01)，兩組生存曲線比較有顯著差異(P<0.01)。 三、PTEN和AKT mRNA表達(dá) 胃上、下部癌組織中PTEN mRNA檢出率均低于癌旁組織(57.1％ vs 94.3％、72.2％ vs 96.3％，p<0.05)；電泳條帶的平均灰度值明顯低于癌旁組織(0.27±0.08vs0.63±0.23、0.42±0.12vs0.72±0.16，p<0.05)； 胃上、下部癌組織中AKT mRNA檢出率和電泳條

7、帶條帶的平均灰度值與癌旁組織相比無統(tǒng)計學(xué)差異(p>00.05)。 胃上部癌組織PTEN mRNA檢出率低于胃下部癌(57.1％ vs 72.2％，p<0.05)；電泳條帶的平均灰度值低于胃下部癌(0.27±0.08 vs 0.42±0.12,p<0.05)。 胃上部癌組織AKT mRNA檢出率高于胃下部癌組織(88.6％ vs 79.6％，p<0.05)；電泳條帶的平均灰度值與胃下部癌相比無統(tǒng)計學(xué)差異(p>0.05)。

8、 四、免疫組化分析 PTEN、AKT和pAKT蛋白在胃上、下部癌中表達(dá)胃上、下部癌中PTEN表達(dá)明顯低于癌旁組織(48.6％ vs 91.4％、66.7％ vs 94.4％，p<0.05)；胃上、下部癌中AKT表達(dá)稍高于癌旁組織(80.0％ vs 74.3％、74.1％ vs 72.2％)，無統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05)；胃上、下部癌中pAKT表達(dá)高于癌旁組織(82.9％ vs 62.9％、68.5％ vs 63.0％，p<

9、0.05)。 胃上部癌中PTEN表達(dá)明顯低于胃下部癌(48.6％ vs 66.7％，p<0.05)；胃上部癌中AKT表達(dá)稍高于胃下部癌(80.0％ vs 74.1％)，沒有統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05)；胃上部癌中pAKT表達(dá)高于胃下部癌(82.9％vs 68.5％，p<0.05)。 胃上、下部癌中PTEN積分光密度平均值明顯低于癌旁組織(850.32±92.89 vs1417.79±35.24、1101.43±57.62

10、vs 1602.28±47.12，p<0.05)；胃上、下部癌中AKT積分光密度平均值與癌旁組織相近(1267.86±88.49 vsl279.14±23.56、1336.29±21.82 vs 1518.93±35.67)，無統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05)；胃上、下部癌中pAKT表達(dá)高于癌旁組織(1190.96±133.87 vs 1057.27±18.53、1096.83±51.57vs995.27±14.64，p<0.05)。胃上部癌

11、中PTEN積分光密度平均值低于胃下部癌(850.32±92.89 vs1101.43±57.62，p<0.05)；胃上部癌中AKT表達(dá)與胃下部癌相近(1267.86±88.49vs1227.49±26.13)，沒有統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.01)；胃上部癌中pAKT表達(dá)高于胃下部癌(1190.96±133.87vs 1096.83±51.57，p<0.05)。 五、免疫印跡分析 PTEN、AKT和pAKT蛋白在胃上、下部癌中表

12、達(dá)胃上、下部癌中PTEN蛋白陽性雜交條帶的平均灰度值明顯低于癌旁組織(75.4±3.7 vs 121.5±2.9、92.6±2.1 vs 125.7±1.4，p<0.05)；胃上、下部癌中AKT蛋白陽性雜交條帶的平均灰度值與癌旁組織相近(128.2±4.5 vs 119.3±1.5、125.9±2.8 vsl20.7±3.2)，無統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05)；胃上、下部癌中pAKT陽性雜交條帶的平均灰度值高于癌旁組織(145.6±4.1

13、vs 95.3±1.6、120.2±2.6 vs101.5±2.4，p<0.05)。 胃上部癌組織PTEN蛋白陽性雜交條帶的平均灰度值低于胃下部癌(75.4±3.7vs 92.6±2.1，p<0.05)；胃上部癌組織AKT蛋白陽性雜交條帶的平均灰度值與胃下部癌相近(119.3±1.5 vs 128.2_±4.5)，無統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05)；胃上部癌組織pAKT蛋白陽性雜交條帶的平均灰度值高于胃下部癌(145.6±4.1 vs

14、 120.2±2.6，p<0.05)。 結(jié)論： 與胃下部癌相比，胃上部癌男性明顯多于女性，腫塊直徑≥5cm的病例明顯增多，生長方式為彌漫性者多，團(tuán)塊性者少。胃上部癌早期胃癌明顯減少，進(jìn)行期胃癌居多，進(jìn)行期胃癌中又以Borrmann 3型明顯增多。胃上部癌TNM分期偏晚，T1期明顯減少，T3期和T4期明顯增多，N2+N3期淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移明顯增多。胃上部癌低未分化型為主，手術(shù)根治程度較胃下部癌差，以相對根治和姑息根治為主，絕對根

15、治比例明顯減少。胃上部癌生存率較胃下部癌明顯降低。 與癌旁組織相比，胃上部癌和胃下部癌組織中PTEN基因表達(dá)缺失且水平下調(diào)。胃上部癌的PTEN基因表達(dá)缺失率高于胃下部癌組織，并且基因表達(dá)水平明顯低于胃下部癌組織。 Akt基因普遍存在于胃上、下部癌和癌旁組織中，表達(dá)水平無明顯差異，但胃上部癌組織中Akt基因活化程度高于胃下部癌。 與癌旁組織相比，胃上部癌和胃下部癌組織中PTEN蛋白表達(dá)缺失且水平下調(diào)。胃上部癌的PT