Nrf2參與脂氧素對腦缺血再灌注損傷保護作用的機制研究.pdf

1、研究背景:腦缺血再灌注雖然可以挽救瀕臨死亡的神經(jīng)細胞,但與此同時又可加重對缺血細胞的損傷,導致嚴重的遲發(fā)型神經(jīng)元損傷,影響患者的預后和功能恢復,即再灌注損傷。它是由多種原因引起的復雜的病理生理過程,大量研究表明,在缺血再灌注時會伴隨大量活性氧自由基(ROS)的產(chǎn)生,通過氧化反應與腦組織中的脂質、DNA和蛋白發(fā)生反應,導致細胞壞死和凋亡,是造成腦損傷的重要機制。紅細胞系-2 p45(NF-E2)相關因子-2(nuclear factor

2、erythroid-2 related factor2,Nrf2)是一種可以調節(jié)許多抗氧化基因轉錄的轉錄因子,其轉錄產(chǎn)物可通過一系列的酶促反應降低ROS的含量。因此,增強腦缺血再灌注后Nrf2的表達進而降低ROS的含量勢必會對改善腦缺血疾病的預后有著重要的意義。脂氧素(Lipoxins,LXs)是體內一種重要的脂質抗炎物質,被稱為炎癥反應的“剎車信號”。我們認為脂氧素很可能通過上調Nrf2的表達對腦缺血再灌注引起的氧化應激和炎癥反應起到

3、保護作用。
　　目的:探討脂氧素對腦缺血再灌注損傷的保護作用及其對Nrf2和P62的調控作用。
　　方法:采用線栓法制作大鼠大腦中動脈閉塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)再灌注模型,實驗分為三組:假手術組(sham),模型組(I/R),脂氧素組(LXA4),用2,3,5三苯基氯化(TTC)染色觀察梗死灶面積,用Western Blot法檢測組織中總Nrf2蛋白,核內Nrf2蛋白

4、以及總P62蛋白的表達。提取大鼠大腦皮層原代的星形膠質細胞,分為三組:空白對照組,缺氧缺糖(oxygen-glucose deprivation,OGD)組,OGD+脂氧素組,用Western blot法檢測細胞內總Nrf2蛋白以及細胞核Nrf2蛋白的表達,用RT-PCR法檢測細胞內P62基因的表達。
　　結果:(1)與模型組相比,脂氧素組梗死灶面積明顯減小。
　　(2)在動物組織中,與模型組相比,脂氧素組Nrf2,P62表

5、達上調。
　　(3)在動物組織中,與模型組相比,脂氧素組核內Nrf2表達上調。
　　(4)在星形膠質細胞內,與OGD組相比,OGD+脂氧素組Nrf2蛋白表達上調。
　　(5)在星形膠質細胞內,與OGD組相比,OGD+脂氧素組細胞核內Nrf2蛋白表達上調。
　　(6)在星形膠質細胞內,與OGD組相比,OGD+脂氧素組P62基因表達上調。
　　結論:脂氧素對腦缺血具有保護作用,通過上調Nrf2和P62的表達來減