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文檔簡介
1、第一部分:香芹酚對小鼠腦缺血再灌注損傷的神經(jīng)保護(hù)作用
目的:觀察香芹酚(Carvacrol,CAR)對小鼠腦缺血再灌注損傷是否具有神經(jīng)保護(hù)作用。
方法:將雄性ICR小鼠隨機(jī)分為假手術(shù)(sham)組、假手術(shù)+CAR組、I/R(tMCAO)組和I/R+CAR組,建立小鼠短暫性大腦中動脈阻塞(transient middle cerebral artery occlusion,tMCAO)模型,觀察CAR的干預(yù)(不同給藥劑
2、量、給藥時間及給藥方式)對小鼠腦梗死體積及神經(jīng)行為功能的影響。
結(jié)果:與I/R組相比,經(jīng)CAR干預(yù)后小鼠的腦梗死體積明顯減小,神經(jīng)行為功能顯著改善。腦缺血再灌注前腹腔預(yù)給予CAR50mg/kg,腦梗塞體積減小了44.3%;神經(jīng)行為學(xué)評分明顯降低(P<0.05);腹腔預(yù)給予CAR25mg/kg腦梗死體積仍有所減?。≒<0.05),而腹腔預(yù)給予CAR5mg/kg腦梗死體積未見減?。≒>0.05),證明該神經(jīng)保護(hù)作用具有藥物劑量依賴
3、性。在腦缺血再灌注后不同時間段分別予以腹腔及側(cè)腦室注射CAR,同樣減小了腦梗死體積;通過對小鼠側(cè)腦室注射 CAR10ug/只,在小鼠腦缺血再灌注后6小時給藥仍能使腦梗死體積減?。≒<0.05)。證明該神經(jīng)保護(hù)作用與注藥時間及注藥方式有關(guān)。
結(jié)論:使用香芹酚干預(yù)小鼠tMCAO模型,小鼠的腦梗死體積明顯減小,神經(jīng)行為功能缺損明顯減輕。這些均提示香芹酚對小鼠腦缺血再灌注損傷具有神經(jīng)保護(hù)作用。
第二部分:香芹酚對小鼠腦缺血再
4、灌注損傷神經(jīng)保護(hù)作用的機(jī)制
目的:研究香芹酚(CAR)對腦缺血再灌注損傷后小鼠腦組織內(nèi)凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響及與PI3K/Akt信號通路的關(guān)系,探討香芹酚神經(jīng)保護(hù)作用的相關(guān)機(jī)制。
方法:將雄性ICR小鼠隨機(jī)分為假手術(shù)(sham)組、假手術(shù)+CAR組、I/R(tMCAO)組和I/R+CAR組;取缺血損傷側(cè)腦組織,采用Western blot法測定t-Akt、p-Akt、Cleaved Caspase-3表達(dá)情況;行側(cè)腦
5、室注射PI3K/Akt信號通路抑制劑LY-294002,通過Westwen blot法測定小鼠腦組織內(nèi)t-Akt及p-Akt的表達(dá)水平。觀察注射LY-294002后對CAR神經(jīng)保護(hù)作用的影響。
結(jié)果:Western blot測定凋亡相關(guān)蛋白Cleaved Caspase-3顯示:與sham組及sham+CAR組相比,I/R組和I/R+CAR組中Cleaved Caspase-3的表達(dá)水平顯著增高(P<0.05);與I/R組相比
6、,I/R+CAR組的Cleaved Caspase-3表達(dá)水平明顯下降。與sham組相比,I/R組p-Akt的表達(dá)增高(P<0.05);與I/R組相比,I/R+CAR組p-Akt表達(dá)顯著增高(P<0.05);側(cè)腦室注入LY-294002, LY-294002可以有效抑制p-Akt表達(dá)水平;在tMCAO模型中,CAR的神經(jīng)保護(hù)作用因為LY-294002的干預(yù)而消失,腦梗塞體積與I/R組沒有明顯差異(P>0.05)。
結(jié)論:香芹酚
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