三種支架用于牙周組織工程的體外實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的
　　對(duì)單純殼聚糖、殼聚糖-絲素蛋白復(fù)合體、殼聚糖-絲素蛋白-磷酸三鈣復(fù)合體這三種支架材料進(jìn)行相關(guān)體外實(shí)驗(yàn)研究，探索生物材料用于牙周組織工程的優(yōu)化方法，為牙周組織工程支架材料的選擇和進(jìn)一步的動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法
　　采用二次冷凍干燥技術(shù)制備單純殼聚糖、殼聚糖-絲素蛋白復(fù)合體、殼聚糖-絲素蛋白-磷酸三鈣復(fù)合體三種支架，研究三種支架的微觀結(jié)構(gòu)、力學(xué)性能、體外降解性；同時(shí)將大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞分離培養(yǎng)、誘導(dǎo)后

2、，與三種支架材料體外共培養(yǎng)，從支架的細(xì)胞毒性、直接接觸實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞粘附率、細(xì)胞增殖活性等方面來(lái)評(píng)價(jià)三種支架材料的細(xì)胞相容性。
　　結(jié)果
　　1、三種支架的微觀結(jié)構(gòu)、力學(xué)性能、體外降解性的檢測(cè)結(jié)果
　　相比單純殼聚糖和殼聚糖-絲素蛋白復(fù)合體支架而言，殼聚糖-絲素蛋白-磷酸三鈣復(fù)合體支架大體形貌穩(wěn)定，冰凍切片光鏡下測(cè)量的孔徑值、孔隙率最大，分別為0.30±0.10mm、81.68±8.71％；壓縮強(qiáng)度最大，為1.44±0.9

3、6MPa；體外降解率第1、2周時(shí)三種支架相近，到第3、4周時(shí)，單純殼聚糖和殼聚糖-絲素蛋白復(fù)合體支架降解速率加快，分別為67.05±1.70%、71.65±2.48%，而殼聚糖-絲素蛋白-磷酸三鈣復(fù)合體支架的降解速率減慢，為58.06±1.99%，但與組織再生速度相匹配。
　　2、支架的細(xì)胞毒性檢測(cè)結(jié)果
　　MTT法檢測(cè)到的殼聚糖-絲素蛋白-磷酸三鈣復(fù)合體支架各時(shí)間點(diǎn)各濃度浸提液對(duì)L-929（小鼠皮膚成纖維細(xì)胞）的相對(duì)增殖率

4、均在75%以上,毒性分級(jí)為0級(jí)或1級(jí)，無(wú)細(xì)胞毒性，生物相容性好，可作為體內(nèi)植入材料。
　　3、三種支架的細(xì)胞相容性檢測(cè)結(jié)果
　　掃描電鏡下，細(xì)胞在三種支架內(nèi)生長(zhǎng)狀態(tài)均良好，形態(tài)飽滿，伸出多個(gè)突起粘附于材料表面,在支架的孔隙內(nèi)分散或集中分布。相比單純殼聚糖和殼聚糖-絲素蛋白復(fù)合體支架而言，殼聚糖-絲素蛋白-磷酸三鈣復(fù)合體支架細(xì)胞粘附率和細(xì)胞增殖活性更高，能促進(jìn)骨髓基質(zhì)細(xì)胞的粘附與增殖。
　　結(jié)論
　　利用不同性質(zhì)的