2型糖尿病及阿爾茨海默病大鼠海馬組織mTOR及Tau蛋白磷酸化的研究.pdf

1、目的：
　　 1.觀察2型糖尿病及阿爾茨海默病大鼠海馬組織mTOR及磷酸化Tau蛋白的水平。
　　 2.探討mTOR在2型糖尿病增加阿爾茨海默病發(fā)病風(fēng)險機(jī)制中的作用。
　　 方法：
　　 體重(200±20)g的SD雄性大鼠，隨機(jī)分為4組：正常對照組，2型糖尿病模型組(T2DM組)，阿爾茨海默病模型組(AD組)，2型糖尿病合并阿爾茨海默病模型組(T2DM+AD組)。采用高糖高脂飲食+一次性腹腔注射鏈脲佐菌

2、素(STZ)的方法建立T2DM大鼠模型。采用血糖儀測血糖，以空腹血糖(FBG)≥16.7 mmol/L作為2型糖尿病造模成功標(biāo)準(zhǔn)。采用向雙側(cè)海馬一次性注射凝聚態(tài)Aβ1-40的方法建立AD模型。利用Morris水迷宮實驗判斷AD造模是否成功。
　　 1.下腔靜脈采血，測定空腹血糖、總膽固醇、甘油三酯。
　　 2.利用Morris水迷宮實驗觀察各組大鼠學(xué)習(xí)記憶力的變化。
　　 3.利用免疫組織化學(xué)方法檢測各組大鼠海馬

3、組織mTOR及磷酸化Tau蛋白的水平。
　　 4.利用RT-PCR技術(shù)檢測各組大鼠海馬組織mTORmRNA及總Tau蛋白mRNA的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1.代謝指標(biāo)：與正常對照組及AD組大鼠比較，T2DM組及T2DM+AD組大鼠的空腹血糖、總膽固醇及甘油三酯水平均顯著升高(P<0.01)，正常對照組與AD組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，T2DM+AD組水平顯著高于T2DM組(P<0.05)。

4、　　 2.Morris水迷宮實驗：與正常對照組及T2DM組大鼠比較，AD組及T2DM+AD組大鼠的學(xué)習(xí)記憶力明顯減退(P<0.01)，且正常對照組與T2DM組之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，AD組與T2DM+AD組之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　 3.免疫組織化學(xué)：與正常對照組及AD組大鼠比較，T2DM組及T2DM+AD組大鼠海馬組織mTOR的表達(dá)水平顯著升高(P<0.05)，且正常對照組與AD組之間差異無統(tǒng)

5、計學(xué)意義(P>0.05)，T2DM組與T2DM+AD組之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。
　　 與正常對照組及T2DM組大鼠比較，AD組及T2DM+AD組大鼠海馬組織磷酸化Tau蛋白的表達(dá)水平顯著升高(P<0.01)，且正常對照組與T2DM組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，AD組與T2DM+AD組之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。
　　 4.RT-PCR：與正常對照組及AD組大鼠比較，T2DM組及T2DM+

6、AD組大鼠海馬組織mTORmRNA表達(dá)明顯增強(qiáng)(P<0.05)，且正常對照組與AD組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，T2DM組與T2DM+AD組之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。
　　 與正常對照組及T2DM組大鼠比較，AD組及T2DM+AD組大鼠海馬組織總Tau蛋白mRNA表達(dá)強(qiáng)度明顯增強(qiáng)(P<0.01)，且正常對照組與T2DM組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，AD組與T2DM+AD組之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<