mTOR信號通路過度激活介導(dǎo)糖尿病小鼠海馬組織Tau蛋白異常磷酸化.pdf

1、目的:研究鏈脲佐菌素（streptozotocin，STZ）誘導(dǎo)的糖尿病小鼠海馬組織mTOR信號通路(p-mTOR和p-p70S6K)的變化及其與Tau蛋白過度磷酸化的關(guān)系。
　　方法:6周齡雄性C57BL/6J小鼠50只隨機(jī)分成正常組（Con組）10只和糖尿病組40只。適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，采用腹腔注射STZ(200mg/kg)的方法建立糖尿病組，48小時后測尾靜脈隨機(jī)血糖≥16.7mmol/I視為造模成功(n=38);正常對照組（

2、Con組，n=10）小鼠予以腹腔注射等量檸檬酸緩沖。建模成功后將糖尿病組隨機(jī)分為糖尿病對照組（DM組，n=19）和糖尿病雷帕霉素干預(yù)組(Rap組，n=19)。Rap組小鼠給予腹腔注射雷帕霉素溶液（2000ul/kg即2.5mg雷帕霉素粉末溶入2000ul DMSO中），每日一次，DM組和Con組小鼠予以相同容積的DMSO溶液腹腔注射，每日一次。干預(yù)15天后，一部分小鼠取血檢測血糖，取新鮮海馬組織-80℃凍存，用于提取組織蛋白行Weste

3、rn bloting檢測p-mTOR、p-p70S6K、p-Tau的表達(dá)，剩余的小鼠用4％多聚甲醛灌注后取腦，石蠟切片行免疫組化染色。
　　結(jié)果:(1)海馬組織HE染色結(jié)果顯示，Con組海馬組織結(jié)構(gòu)完整，錐體細(xì)胞排列整齊，致密，形態(tài)正常。DM組和Rap組錐體細(xì)胞層紊亂、中斷、數(shù)量減少。(2)海馬組織免疫組化結(jié)果顯示，與Con組相比，DM組小鼠海馬組織錐體細(xì)胞p-Tau(Ser396)表達(dá)增加，胞漿中可見大量深棕黃色陽性表達(dá)顆粒，染

4、色強(qiáng)度明顯增強(qiáng);與DM組相比，Rap組小鼠海馬組織錐體細(xì)胞p-Tau(Ser396)表達(dá)減少，見小量的棕黃色表達(dá)顆粒，染色強(qiáng)度較淺。(3)與Con組相比，DM組小鼠海馬組織p-Tau(Ser396)表達(dá)增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05);與DM組相比，Rap組小鼠海馬組織p-Tau(Ser396)表達(dá)減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)。(4)與Con組相比，DM組小鼠海馬組織p-mTOR(Ser2448)及p-p70S6K(Th