EphB2受體在阿爾茨海默病模型小鼠的表達差異及其對tau蛋白磷酸化的影響和機制.pdf

1、背景：EphB2受體是受體酪氨酸激酶家族中的一員，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中主要調(diào)節(jié)神經(jīng)元之間的接觸、神經(jīng)嵴的遷移、軸突導(dǎo)向和突觸發(fā)生。在阿爾茨海默?。ˋlzheimer’s disease，AD）患者和AD 轉(zhuǎn)基因小鼠發(fā)病早期，海馬EphB2受體表達降低，在擬AD模型小鼠（hAPP J20）的海馬齒狀回表達EphB2慢病毒質(zhì)粒，可逆轉(zhuǎn)N-甲基-D-天冬氨酸（N-methyl-D-aspartic acid，NMDA）受體依賴的長時程增強的降低，

2、同時改善動物的學(xué)習(xí)記憶障礙。然而，關(guān)于EphB2在AD進展中各腦區(qū)及細胞內(nèi)的改變目前尚無報道。另外，大量文獻報道β-淀粉樣多肽（β-Amyloid，Aβ）寡聚體可誘導(dǎo)胞內(nèi)微管相關(guān)蛋白tau的過度磷酸化，最終形成神經(jīng)纖維纏結(jié)（neurofibrillary tangle，NFT）。但是，關(guān)于EphB2受體是否介導(dǎo)Aβ引起的tau 蛋白過度磷酸化及其下游信號通路，上調(diào)EphB2能否逆轉(zhuǎn)AD樣病理改變，目前未見報道。
　　 目的：探討

3、EphB2在AD 樣病理改變發(fā)生發(fā)展中的作用、EphB2受體是否介導(dǎo)Aβ引起的tau 蛋白過度磷酸化及其下游信號通路。
　　 方法：免疫組織化學(xué)、免疫印跡、原代海馬神經(jīng)元培養(yǎng)、細胞培養(yǎng)、免疫熒光染色、質(zhì)粒轉(zhuǎn)染等。
　　 結(jié)果：在擬AD 轉(zhuǎn)基因小鼠（Tg2576）模型中，EphB2的表達量在AD 最易受累的腦區(qū)，如嗅球、海馬和額葉皮層，明顯下降，其中以嗅球的病變出現(xiàn)最早，隨后受累的是海馬和大腦額葉皮層。隨著EphB2含量的

4、增齡性降低，嗅球外叢狀層（external plexiform layer，EPL）的纖維結(jié)構(gòu)排列也愈加紊亂；在皮層還觀察到EphB2從神經(jīng)元的突起向細胞內(nèi)轉(zhuǎn)位聚集的現(xiàn)象。在同一腦區(qū)及同批體外培養(yǎng)的神經(jīng)元中，EphB2的降低比MAP2 含量的降低出現(xiàn)更早。在SK-N-SH，HEK293-tau和原代培養(yǎng)海馬神經(jīng)元中的研究發(fā)現(xiàn)，由Aβ引起的tau 蛋白過度磷酸化早于EphB2的降低。激活內(nèi)源性EphB2或過表達和外源性EphB2受體可降低

5、tau 蛋白的磷酸化水平，同時伴有磷脂酰肌醇-3-激酶（phosphatidylinositol-3-kinase，PI3K）和蛋白激酶B（protein kinase B，PKB或Akt）的激活和糖原激酶合酶-3β（glycogen synthase kinase-3β，GSK-3β）的活性抑制。敲除EphB2受體的細胞內(nèi)激酶區(qū)（VM，或KD）消除了EphB2受體對tau蛋白的去磷酸化作用，而敲除其PDZ 結(jié)合結(jié)構(gòu)域不影響EphB2受