慢性心理應(yīng)激導(dǎo)致皮膚氧化應(yīng)激損傷及毛囊生長(zhǎng)期延遲.pdf

1、目的:1、建立慢性束縛應(yīng)激(Chronic restraint stress，CRS)模型，觀察心理應(yīng)激對(duì)小鼠毛囊周期的影響。2、研究P物質(zhì)( substance P，SP)，氧化應(yīng)激(Oxidativestress)，肥大細(xì)胞(Mast cell，MC)在心理應(yīng)激引起毛囊周期改變這一過程中的作用。3、探討脫發(fā)的發(fā)病機(jī)制，為其預(yù)防、治療及新藥開發(fā)提供新思路和更可靠的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法:1、采用C57BL/6雄鼠建立CRS模型

2、，與Control組比較，從肉眼和組織形態(tài)學(xué)觀察動(dòng)物毛囊周期的改變。2、在原有Control，CRS兩組基礎(chǔ)上，加入腹腔注射抗氧化劑和SP受體阻斷劑兩組，所有小鼠隨機(jī)分為四組:Control組、CRS組、CRS+抗氧化劑組（Tempol組）、CRS+SP受體阻斷劑組（RP67580組）。使用脫毛術(shù)誘導(dǎo)小鼠背部毛囊進(jìn)入生長(zhǎng)期，選取脫毛后第9天和第19天作為時(shí)間點(diǎn)采集標(biāo)本，觀察體重、行為、皮膚顏色和毛囊組織形態(tài)的改變并對(duì)毛囊進(jìn)行評(píng)分，檢測(cè)血

3、漿皮質(zhì)醇水平，皮膚組織中硫代巴比妥酸反應(yīng)產(chǎn)物( TBARS)水平，超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活力;甲苯胺藍(lán)染色切片觀察皮膚肥大細(xì)胞脫顆粒比例;免疫熒光法觀察皮膚SP免疫反應(yīng)陽性(SP+)神經(jīng)纖維數(shù)量。
　　 結(jié)果:1、脫毛后第9天，與Control組相比，CRS組皮膚呈粉色，灰度率顯著升高(P＜0.05)，毛囊平均分顯著降低(P＜0.05)，生長(zhǎng)期延遲出現(xiàn);脫毛后第19天，與Control組相比

4、，CRS組皮膚皮膚呈黑色，灰度率和毛囊平均分均顯著降低（P＜0.05），退行期延遲出現(xiàn)。2、(1)與Control組相比，CRS組、Tempol組、RP67580組小鼠體重和曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中3min內(nèi)運(yùn)動(dòng)距離均顯著降低（P＜0.05），血漿皮質(zhì)酮水平顯著升高（P＜0.05），提示慢性束縛應(yīng)激模型造模成功;(2)與Control組相比，CRS組皮膚組織TBARS水平顯著升高（P＜0.05），SOD、GSH-Px活力顯著降低(P＜0.05);同C

5、RS組相比，Tempol組和RP67580組皮膚TBARS水平顯著降低(P＜0.05)、GSH-Px活力顯著升高(P＜0.05);(3)脫毛后第9天，與CRS組相比，Tempol組和RP67580組皮膚呈灰色，灰度率顯著降低(P＜0.05)，毛囊平均分顯著升高(P＜0.05);脫毛后第19天，與CRS組相比，Tempol組和RP67580組皮膚呈灰色，灰度率和毛囊平均分顯著升高(P＜0.05)，毛囊周期未見明顯延遲;(4)與Contro

6、l組相比，CRS組皮膚SP+神經(jīng)纖維數(shù)量明顯升高(P＜0.05);與CRS組相比，Tempol組和RP67580組皮膚SP+神經(jīng)纖維數(shù)量明顯降低(P＜0.05)。(5)同C組相比，CRS組皮膚肥大細(xì)胞脫顆粒比例明顯升高(P＜0.05);與CRS組相比，Tempol組和RP67580組皮膚肥大細(xì)胞脫顆粒比例明顯降低（P＜0.05）。
　　 結(jié)論:1、慢性束縛應(yīng)激可以導(dǎo)致毛囊周期的異常，表現(xiàn)為生長(zhǎng)期延遲出現(xiàn)。2、慢性束縛應(yīng)激可以引起